【摘 要】
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苹果炭疽叶枯病是由胶胞炭疽菌(Glomerella cingulata)引起，在我国山东、河南、河北、陕西、山西等苹果主产区连年大发生，给苹果产业带来严重经济损失.该病害发病速度快，从侵染叶片到始见病斑仅需2天.病斑由初期的褐色小点随病情发展为不规则的大型坏死斑，在4～5天造成树体大量落叶.果实受侵染初期在表面形成大量深褐色病斑，后期病斑连接成片，严重影响果实的品质.苹果炭疽叶枯病已经从一种苹果新
【机 构】
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中国农业科学院果树研究所,兴城125100
【出 处】
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中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨2017年学术年会
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苹果炭疽叶枯病是由胶胞炭疽菌(Glomerella cingulata)引起，在我国山东、河南、河北、陕西、山西等苹果主产区连年大发生，给苹果产业带来严重经济损失.该病害发病速度快，从侵染叶片到始见病斑仅需2天.病斑由初期的褐色小点随病情发展为不规则的大型坏死斑，在4～5天造成树体大量落叶.果实受侵染初期在表面形成大量深褐色病斑，后期病斑连接成片，严重影响果实的品质.苹果炭疽叶枯病已经从一种苹果新病害上升为苹果的重要病害.目前，国内外关于苹果炭疽叶枯病菌的病原和侵染流行规律已相对清楚，主要集中于致病机理等方面的研究.本实验室已经通过建立农杆菌介导的苹果炭疽叶枯病菌遗传转化技术体系，构建了苹果炭疽叶枯病菌菌株W16的T-DNA插入突变体库，并通过致病性测定筛选得到多株致病性变异的突变体.其中突变体M63丧失了致病能力，利用Southern杂交技术进行检测，结果显示突变体M63的T-DNA插入为单拷贝插入.利用TAIL-PCR扩增突变体M63的侧翼序列，获得了T-DNA插入位点的左臂侧翼序列，通过与数据库中围小丛壳菌23基因组数据比对，得知T-DNA插入位点位于基因组数据库Scaffold-3序列.Fgenesh程序预测该基因是由3个外显子和2个内含子组成，共含有2 568个碱基，外显子碱基2 202个，编码氨基酸733个.通过生物信息学分析预测编码蛋白并且亚细胞定位预测，定位于细胞核上.通过PCR成功克隆了FR18基因，并将其与红色报告基因融合构建瞬时表达载体，通过侵染烟草试验初步验证该基因功能.并通过同源重组敲除FR18基因，已获得敲除突变体菌株.通过观察菌落形态、孢子萌发、侵染钉形成等过程探究该基因的功能.本研究结果将为进一步鉴定苹果胶胞炭疽菌效应因子及其功能，解析"苹果胶胞炭疽菌一苹果"互作分子机制提供重要帮助，具有重要的意义.
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