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IspD蛋白是植物和细菌2C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸途径(MEP途径)的关键酶,建立IspD蛋白克隆表达及其酶抑制剂的高通量筛选方法在发展新型除草剂和杀菌剂研究中具有重要意义。本文首先尝试从拟南芥中提取总RNA,逆转录合成cDNA,采用PCR扩增,获得全长IspD基因和IspD(76-303)活性域片段基因,连接至pCold Ⅰ载体,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)进行了高效表达。