IspD蛋白克隆表达和及其抑制剂高通量活性筛选

来源 :中国化学会第十届全国化学生物学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuw_ei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  IspD蛋白是植物和细菌2C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸途径(MEP途径)的关键酶,建立IspD蛋白克隆表达及其酶抑制剂的高通量筛选方法在发展新型除草剂和杀菌剂研究中具有重要意义。本文首先尝试从拟南芥中提取总RNA,逆转录合成cDNA,采用PCR扩增,获得全长IspD基因和IspD(76-303)活性域片段基因,连接至pCold Ⅰ载体,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)进行了高效表达。
其他文献
环状核苷酸类化合物作为第二信使分子对很多细胞过程有着重要的调控作用.最早发现的环状核苷酸类化合物是cAMP[1]和cGMP,前者可以激活蛋白激酶A,后者可激活蛋白激酶G.
本研究基于BRD4 的PPI,TCGA 数据分析结合免疫共沉淀首次发现了BRD4 和AMPK的潜在直接相互作用;基于BRD4 的晶体结构结合虚拟筛选和结构修饰等手段开发设计得到了一系列噻吩并嘧啶酮全新骨架的BRD4 特异性抑制剂,并通过酶活力,细胞活力及自噬活力评价发现新型诱导自噬的BRD4 高选择性抑制剂8f[1];8f 通过抑制BRD4 激活AMPK进而诱导乳腺癌细胞AMPK-mTOR-ULK
源于古原核生物硫化叶菌的P450 119 酶是热稳定性P450 酶,晶体结构解析和定点突变研究表明催化活性位点的结构改造不影响其热稳定性,并具有过氧化酶(Peroxygenase)功能结构,能催化苯乙烯类底物的不对称环氧化反应,具有高度的区域选择性和立体选择性,在苯丙烯类天然产物环氧化合成中具有较好的应用前景[1-4]。
提高作物产量与品质,是保障国家粮食和食品安全两项重大核心问题.但从作物生长过程中对养分、资源分配角度而言,同时保持抗病性和高产、优质性状之间存在一定程度的矛盾.新发现的五谷丰素链霉菌及代谢的天然产物五谷丰素,它们不仅可以大幅度提高水稻、玉米等农作物的产量,而且具有好的抗病性.五谷丰素链霉菌伴随着菌株在拟南芥根内部的定殖,拟南芥的生长得到了促进.
会议
使用化学杀藻剂抑制蓝藻生长或杀灭蓝藻是快速有效解决蓝藻水华问题的重要防治手段,而获得具有高选择性的杀藻剂是现代化学杀藻剂研究创制中急需解决的一个重要现实问题.以藻类光合作用系统中重要调控蛋白或酶为靶标进行抑制剂的设计与筛选有望获得高选择性的杀藻剂.然而,目前很少有以藻类光合作用系统中重要调控蛋白或酶为靶标而获得的抑制剂报道.
会议
Acetohydroxyacid synthase(AHAS,E.C.2.2.1.6)is the first enzyme in the branched chain amino acid biosynthesis pathway.Five of the most widely used commercial herbicides(i.e.sulfonylureas and imidazolin
Flumorph is a carboxylic acid amide(CAA)fungicide expressing high activity against oomycetes.The sensitivity of 120 Phytophthora sojae isolates to flumorph was determined.The baseline sensitivities we
目前,由于人们对健康问题,生命科学以及环境保护问题的日益关注,使得针对微量分析物的定量检测各种分析方法得到不断发展。光电化学检测技术作为一种新兴的分析检测技术,由于其具有高灵敏度、便携性以及易集成化,吸引了研究工作者们广泛的关注。
近年来,新烟碱类杀虫剂由于对非靶标生物蜜蜂的安全性问题陆续被欧盟各国家禁用[1]。与此同时,研究人员针对新烟碱类杀虫剂的蜂毒问题开展了广泛深入研究,多篇Nature 和Science 从实验室到大型野外研究均确证了新烟碱类杀虫剂的确对蜜蜂的健康和行为等存在影响[2-4]。
Ⅱ 型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(fructose-1,6-bisphosphate aldolases,简称FBA-Ⅱ)由于不存 在于动物与高等植物中的特点,逐渐成为开发系统性真菌感染药物备受关注的新型靶标。现阶段尽管已有部分FBA-Ⅱ 抑制剂的报道,但这些抑制剂均为表现出抑制真菌生长的效果。