【摘 要】
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猪瘟与伪狂犬病是严重危害养猪业的两种疫病。猪瘟与伪狂犬病病毒引起成年猪的混合感染造成的危害更加严重.我们在一份经RT-PCR扩增猪瘟病毒阳性的病料接种PK-15细胞分离猪瘟病毒时,病料接种细胞40h后观察到细胞变圆等细胞病变,接种细胞50h后在仅出现细胞病变但细胞未脱落时用丙酮固定,通过间接免疫荧光实验观察到猪瘟病毒特异的绿色荧光.经电镜观察,设计特异引物PCR扩增,以及动物实验证明引起细胞病变的
【机 构】
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吉林大学,畜牧兽医学院,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062 军事
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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猪瘟与伪狂犬病是严重危害养猪业的两种疫病。猪瘟与伪狂犬病病毒引起成年猪的混合感染造成的危害更加严重.我们在一份经RT-PCR扩增猪瘟病毒阳性的病料接种PK-15细胞分离猪瘟病毒时,病料接种细胞40h后观察到细胞变圆等细胞病变,接种细胞50h后在仅出现细胞病变但细胞未脱落时用丙酮固定,通过间接免疫荧光实验观察到猪瘟病毒特异的绿色荧光.经电镜观察,设计特异引物PCR扩增,以及动物实验证明引起细胞病变的病毒为伪狂犬病毒.经测定分离到的伪狂犬病毒TCID50为10-6.14/0.1mL,该毒株对小鼠和兔具有很高的致病性。对分离到的猪瘟病毒通过RT-PCR扩增部分E2基因与猪瘟病毒石门株、兔化弱毒株、ALfort株以及Bresica株进行比较分析,该毒株与ALfort株同属于基因2型。由此确定该份临床疑似猪瘟病例为猪瘟病毒与伪狂犬病毒混合感染。
其他文献
针对近年来吉林省一些规模化养殖场频繁发生以母猪流产、死胎、木乃伊、仔猪呼吸道症状等为特征的流行性传染病,2006年8月～2007年4月期间,对吉林某规模化养猪场连续跟踪,共计460头猪进行了调查,其中有哺乳仔猪、保育圈仔猪、育肥猪、繁殖母猪等,共剖检125头猪,经RT-PCR检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒,分离到肺炎克雷伯菌,通过调查,初步确定该猪场的"高热症"是由猪繁殖与呼吸综合症病毒所引发,继发
应用Marc-145细胞从福建某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病死猪脾脏和淋巴结中分离到一株病毒.该分离毒经Marc-145细胞6次传代后出现稳定的细胞病变(CPE),其TCID50为10-4.25/0.1ml；间接免疫荧光试验表明,感染分离毒的CPE细胞仅与抗PRRSV单克隆抗体反应并出现特异性的胞浆荧光；序列测定表明分离毒的ORF7基因与LV、B13、Ningbo42株的核苷酸同源性分
根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株ORF5基因序列设计1对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增PRRSVHn/06-1分离株ORF5基因片段。将扩增片段克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,测序后用DNAstar序列分析。构建的PcDNA-ORF5重组质粒瞬时转染293T细胞,48h后用Western-blot检测,证明ORF5蛋白在293T细胞
从河南省某些发病猪场分别分离到一株狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并进行了鉴定。利用自行分离的PRV和PRRSV作为混合抗原,免疫小鼠后用一次融合、分别筛选的方法,获得了能分别稳定分泌抗2种抗原的单抗杂交瘤细胞株.其中2株抗PRV的单克隆抗体杂交瘤细胞株,3株抗PRRSV的单克隆抗体杂交瘤细胞株.其免疫球蛋白均为IgG2.分泌的抗PRV单克隆抗体与AIV、NDV、PPV
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征的病原体,本文综述了PRRSV的分子生物学最新研究进展,主要包括PRRSV的基因组结构、病毒蛋白及其功能、病毒的变异、分子生物学诊断、疫苗防治技术的研究等,旨在为该病的研究和控制提供借鉴。
PRRS对养猪业造成的危害越来越大,PRRS疫苗的研究显得越发重要.到目前为止,预防PRRS主要使用的是弱毒活疫苗,但是,正是它的广泛使用,使得PRRS疫情也越来越复杂。本文综述了国内外PRRS弱毒活疫苗的研究进展,以及PRRS弱毒苗的副作用、交叉保护性以及影响因素。
以北美株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆(pCBC)为平台进行反向遗传操作,分别在pCBC的ORF2和ORF3间,ORF5和ORF6间,ORF6和ORF7间插入PCV2的ORF2,依次获得三个嵌合克隆(pCPV,p6PC,p7PC)。转染PRRSV易感细胞MARC-145后得到三个重组病毒,重组病毒在体外培养的共性:遗传不稳定性。继而以重组病毒vCPV为例,利用RT-PCR技术在转录
通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了PRRSV GP5,GP6基因并进行了克隆与鉴定。构建了含GP5基因的真核表达载体pcDNA-GP5,pcDNA-GP5/6,通过与鼠白血病病毒(MuLV)假病毒构建体系的两种质粒pHIT60和pHIT111瞬时共转染人胚肾细293T,48h后收集假病毒上清,将假病毒上清超速离心后用抗PRRSV的多抗通过Western-blot证明GP5蛋白能够在假
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免疫胶体金技术是80年代发展起来的固相标记免疫测定技术,具有单份测定、简单快速、特异敏感等特点。已在被动凝集试验、光镜染色、免疫印迹、免疫斑点渗滤法以及免疫层析技术中得到了应用。最近几年关于免疫金技术在动物医学临床诊断方面的应用也有报道。用胶体金标记提纯后的猪PRRSVIgG,建立了一种以微孔滤膜为固相载体,以红色胶体金为标记物的检测PRRSV的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。关于用胶体金标记提纯