【摘 要】
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为了研制更加安全的鸡白痢沙门氏菌弱毒株,并使其开发为活疫苗载体,本研究构建了鸡白痢沙门菌C79-13△crp△asd缺失株,并以此建成宿主平衡致死系统.双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pRE△asd的大肠杆菌x7213为供体菌,C79-13△crp为受体菌进行接合转移,两步法筛选crp/asd基因双缺失突变株,并通过PCR和测序鉴定.结果表明△crp△asd缺失株被成功构建,命名为C79-
【机 构】
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河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南,洛阳,471003;河南科技大学动物疫病与公共安全重点实验室,河南,洛阳,471003
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第十一次全国学术研讨会暨第五届会员代表大会
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为了研制更加安全的鸡白痢沙门氏菌弱毒株,并使其开发为活疫苗载体,本研究构建了鸡白痢沙门菌C79-13△crp△asd缺失株,并以此建成宿主平衡致死系统.双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pRE△asd的大肠杆菌x7213为供体菌,C79-13△crp为受体菌进行接合转移,两步法筛选crp/asd基因双缺失突变株,并通过PCR和测序鉴定.结果表明△crp△asd缺失株被成功构建,命名为C79-13△crp△asd；进一步研究表明,该缺失株的生长需要外源的二氨基庚二酸(DAP),且能稳定遗传缺失的asd基因,与C79-13相比,其血清型未发生变化,但其生长速度明显减慢.C79-13△crp△asd双缺失株可接受asd+质粒作为宿主平衡致死系统高效稳定地表达外源基因,并为研制安全有效的鸡白痢沙门菌疫苗弱毒株以及进一步将其开发为适于黏膜免疫的口服活载体疫苗奠定了基础.
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从病原学和病理学角度对阜新某个体养鸡场12日龄仔鸡急性死亡的病因进行研究分析。病原学检查结果表明，从病死鸡的嗉囊刮取物做病原菌培养并分离，并利用培养的单个菌落制成涂片看到：该菌革兰氏染色阳性、酵母菌样的菌体和假菌丝，形状呈卵圆形，个体较大较清楚，酷似瓜子状。之后通过细菌分离培养、形态学检验、生化鉴定、药敏实验等对该病原菌进行鉴定，其培养特性和生化特性与鸡念珠菌相似，初步证实该病原菌为鸡念珠菌；药敏
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