狂犬病毒N基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scnbyfy
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狂犬病毒(Rabiesvirus,RV)属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus).是人兽重要共患传染病--狂犬病的病原体[1,2].根据不同毒株的免疫血清学反应和抗狂犬病毒单克隆抗体的分析,将世界各地的狂犬病毒分成4个血清型[3],根据其核蛋白基因N末端500个核苷酸和跨膜糖蛋白基因的同源性,将其分为7个基因型[4].近年来,我国狂犬病疫情一直呈上升趋势,病死数居我国37种法定报告传染病首位.犬是我国人狂犬病最主要的储存宿主和传播宿主,因此对狂犬病主要流行区的犬只进行病原检测和抗体水平监测,对于防制人狂犬病是非常必要的.狂犬病抗体检测方法主要有小鼠中和试验(MNT)、快速荧光灶抑制试验(RFFIT)、荧光抗体病毒中和试验(FAVNT)等,这些方法虽特异灵敏,但需要操作活毒,对实验室的安全设施要求较高,并且存在感染人和容易散毒的危险性.利用大肠杆菌表达的重组蛋白作为诊断试剂没有感染性、成本低廉,基因工程菌可以进行大量发酵培养,便于进行大规模的工业化生产.本试验利用基因工程的方法表达了狂犬病毒N蛋白,在此基础上初步建立了检测犬血清中RV抗体的间接ELISA方法,为狂犬病新型ELISA抗体诊断试剂盒的研制奠定了基础.
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