2,2-二甲基环丙腈水合酶产生菌的氮离子注入选育及突变株产酶条件的研究

来源 :第四届全国发酵工程学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zjundu1980
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离子注入技术近来越来越受到国内外的关注,并被广泛应用于微生物的品种改良.利用N+离子注入法对本实验室保藏的产2,2-二甲基环丙腈水合酶菌种Pseudomonas sp.ZJUT0509进行选育.结果表明,通过离子诱变后的突变株的腈水合酶活性最高可达原始菌株的9倍.对其中F60-4菌种进行产酶条件的优化,其最佳碳、氮源及其用置分别是葡萄糖,2g/l和酵母粉,10g/l,最适初始pH值为6.5,最适发酵温度为20℃.
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20多年来,人们一直关注甘油在厌氧条件下的生物歧化,而忽视了氧对甘油歧化的有利影响,本文将在实验的基础上着重讨论氧对甘油代谢的影响.
从土壤中分离到9株产生β-甘露聚糖酶的芽孢杆菌(Bacillus sp.).Bacillus sp.M50-250mL三角瓶摇瓶培养试验,以4﹪的魔芋粉为碳源,1.0(NH)SO为氮源,0.35﹪NaCO,30~34℃培养60h产酶达到高峰.酶活力为180~200u/mL.100L罐发酵,以2﹪魔芋粉为碳源,在30~32℃,1:0.75v/v/m通气量,200r/min条件下,发酵液酶活力最高可达
D-苯丙氨酸可以一菌双酶法由恶臭假单胞菌一步合成.本文对该菌进行了紫外与5-氟尿嘧啶的综合诱变,筛选到一株酶活较高的突变株JS-01-44,转化率由原来的55﹪提高到65﹪.5-氟尿嘧啶斜面边疆传代10次,转化活力保持稳定.
本文通过建立起一个以苯乙酮蒸气为唯一碳源的新颖筛选模型,从土壤中分离得到一株对(-溴代苯乙酮和苯乙酮具有高立体选择性还原活性的酵母菌,经鉴定为红酵母属,命名为红酵母(Rhodotorula sp.)AS2.2241.通过对该酵母细胞的培养进程的考察,确定酮还原酶在发酵20h时达到最高酶活41.0U/L,并发现苯乙酮对酶活有明显诱导作用.通过对该还原酶进行了部分纯化,酶的纯化倍数达到52.6倍,酶活
准确、迅速和在线测量细胞培养过程中的细胞量是深入研究细胞代谢控制的基础.丝状菌培养液因受不溶培养基以及细胞形态等因素干扰,其生长测定一直无法得到解决.本文对比几种不同细胞生长测定方法,发现流变特性参数随细胞生长呈规律变化,其中表现粘度和稠度系数可以用于丝状菌发酵液细胞生长的表征.
研究了高山红景天悬浮细胞苯丙氨酸氨触酶(PAL)水杨酸(SA)信号转导子对PAL的诱导作用和对红景天细胞生产红景天甙的影响,结果表明,SA加入后24hPAL酶活性出现瞬时提高,其中0.1mM的SA处理后24h后PAL达到最高值,比活为对照的12倍,红景天甙的含量在诱导96h后达到最高,0.01mM的SA促进作用最明显,红景天甙的含量是对照的3.5倍.这些结果说明SA能活化高山红景天悬浮细胞的苯丙烷
研究了NTG的诱变剂量、处理时间以及氯化钠浓度对野生型荧光假单胞菌M18致死率的影响,NTG的诱变剂量25-200μg/ml,处理时间10至30分钟范围内,随着诱变剂剂量增加和时间的延长,微生物的存活率不断下降.NTG的作用剂量25μg/ml,处理时间10分钟时,细菌存活率为55﹪左右.利用细菌存活率为55﹪时的诱变条件,经生物测定,初筛获得20株抑菌效果明显的诱变株.经摇瓶发酵复筛,从这20株诱
PCR扩增了蓝细菌体内偏码ADP-葡萄糖焦磷酸羧化酶(ADPG PPase)的agp基因,通过DNA体外重组,以红霉素抗性基因部分取代agp基因片段,构建了既含agp基因上游及下游序列、又携带选择性标记——红霉素抗生——的pUCAE质粒.该质粒转化野生型集胞藻6803细胞,获得了能在含红霉素的培养基上正常生长的突变株.对该突变株基因组DNA的PCR扩增,结果表明,在agp基因上确实发生了缺失突变.
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