【摘 要】
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自1985年人类发明聚合酶链式反应(PCR)技术以来,PCR技术已广泛应用于动植物基因工程、微生物和医学等领域中,并且随着技术的不断完善与革新,实时荧光定量PCR、数字PCR技术也相继兴起并在不同领域被广泛应用.实时荧光定量PCR技术通过检测PCR产物中荧光讯号强度来达到定量的目的,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度
【机 构】
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河北农业大学动物医学院,河北保定 071001 河北农业大学动物医学院,河北保定 071001;河
【出 处】
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第五届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨北京畜牧兽医学会“瑞普杯”新思想、新观点、新方法演讲会
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自1985年人类发明聚合酶链式反应(PCR)技术以来,PCR技术已广泛应用于动植物基因工程、微生物和医学等领域中,并且随着技术的不断完善与革新,实时荧光定量PCR、数字PCR技术也相继兴起并在不同领域被广泛应用.实时荧光定量PCR技术通过检测PCR产物中荧光讯号强度来达到定量的目的,该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点.随后,和荧光定量PCR相比,数字PCR也发展出了能够绝对定量以及具有更高精确度等的优势,本文对几种常规PCR技术、实时荧光定量PCR技术和数字PCR技术的特点进行了评述,以便于更好的了解及应用这些技术.
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根据NCBI收录的PCV2序列,利用软件Primer5设计的一对扩增PCV2序列的特异性引物.河北某发病猪场的一例疑似病例经检测为阳性,对JX2全基因组序列进行了测定,参考NCBI收录的具有代表性的PCV序列,利用软件DNAStar进行了同源性比对及进化树分析,结果显示JX2序列的长度为1767bp,与参考序列PCV2的同源性为92.8％-99.9％,与参考序列PCV1的同源性为76.2％-77.
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起妊娠母猪繁殖障碍和各年龄猪只(尤其仔猪)呼吸道疾病的重要病毒性病原.近两年来,类NADC30毒株在我国出现、流行并快速演化,其基因组的复杂性进一步增加了我国对该病的防控难度.前期的动物实验结果显示,本实验室分离的类NADC30毒株CHsx1401的致病性与高致病性毒株JXwn06存在很大差异,因此本研究拟围绕引起PRRSV类NADC30毒株与高致病性毒株致
为了确定我国小反刍兽疫各毒株间的进化关系,本研究从GenBank下载世界各国PPRV全基因组序列,以生物信息学方法建立遗传进化树.搜集到30株PPRV全基因组序列,其中我国10株,印度3株,巴基斯坦0株.2013-2014年毒株在同一个分支,2014年北京毒株和同年份的其它毒株相比枝条最长,2015年新疆巴州毒株独立成一个小分支.2014-2015年每一个毒株和2013年新疆伊犁毒株相比,遗传距离
仔猪白痢是由致病性溶血性大肠杆菌引起的1周龄以内初生仔猪的一种急性、高度致死性疾病.仔猪白痢潜伏期短、发病率高,尤其黄痢的死亡率高,给畜牧业超成重大损失.仔猪白痢多见于10～20日龄的仔猪,发病率较高,但致死率较低,病原亦为大肠杆菌,以腹泻、排出腥臭白色水样粪便为特征.进行了病原分离及药物敏感试验,以便对未发病仔猪及发病仔猪给予及时有效的预防和治疗.
目的:明确木犀草素对微血管内皮细胞各信号蛋白NF-κB(p65)、MAPK(p38)、PI3K(p85)磷酸化活性的调节规律,确定VCAM-1表达的机制并进一步提升中药抗炎机制的研究,为研究新型非甾体类抗炎中药应用积累资料.方法:首先通过致炎因子(fMLP)作用于大鼠肺微血管内皮细胞,用Western blotting检测蛋白的变化,确定最佳致炎浓度,其次用不同浓度和不同时间的木犀草素作用于大鼠肺
尼帕病毒是近几年来新出现的人畜共患病毒.尼帕病毒可在猪等动物身上引起严重疾病,给养殖者造成重大经济损失,对人等感染者造成脑部炎症(脑炎)或呼吸系统疾病.本文对尼帕病毒病进行了全面的阐述,更有助于对尼帕病的认识和了解,并采取各方面措施预防这个病,虽然这个病不是太严重,但是一旦爆发,因为没有相应的药物治疗,预防就显得相当重要了.
牛结核病的主要传染源是病畜和带菌畜，传播途径主要为呼吸道传播，奶牛结核病的防治必须坚持“预防为主”的方针政策，采取“监测、检疫、扑杀、消毒”相结合的综合性防治措施，每年1-2次定期开展对牛结核病监测用提纯结核菌素检出的阳性牛群为结核病污染牛群，针对污染牛群应每年进行多次监测，发现阳性病牛及时处理扑杀，直到检疫监测为阴性，连续3次监测均为阴性反应的牛群为健康牛群。对监测、检疫出的阳性奶牛扑杀后进行无
目的:旨在研究调动微血管内皮细胞、从而激活嗜中性粒细胞杀灭细菌的中药,并筛选其中具有显著保护内皮细胞激活嗜中性粒细胞杀菌的单味中药成分及其有效水溶性成分,为日后研发治疗动物细菌性疾病的药物奠定基础.方法:首先确定白头翁汤中的四种中药成分(黄连、黄柏、秦皮、白头翁)以及马齿苋对降低LPS诱导微血管内皮细胞损伤的浓度和时间,其次收集跨过内皮细胞的嗜中性粒细胞,通过庆大霉素保护试验与大肠杆菌共同作用涂板
与猪链球菌2型致病力有关的毒力因子主要包括:溶菌酶释放蛋白(MRP)、胞外因子(EF)、溶血素(Sly),荚膜多糖(CPS),44Kb蛋白和IgG结合蛋白、谷氨酸脱氢酶、纤连蛋白结合蛋白、其他相关毒力蛋白.根据猪链球菌病临诊和病理变化，再结合流行病学特点可以作出初步诊断，确诊需实验室检查:细菌学检查:脓汁、肝、脾、肾组织或心血等，制成涂片或触片。治疗时进行猪隔离治疗，应用抗菌类药物治疗有效。