【摘 要】
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目的：探讨砷对THP-1巨噬细胞和L-02肝细胞胆固醇流出率及胆固醇流出通道基因ABCA1、ABCG1和SR-B1表达的影响,为阐明砷导致血脂异常及动脉粥样硬化的发生机制提供理论依据.方法：THP-1巨噬细胞培养于RPMI1640培养基中,加入LXR/RXR激动剂(4μg/ml22R-OHC和10μmol/L9-cis-RA)预处理6h,随后加入终浓度分别为0.625、1.25、2.5和5μM的亚
【机 构】
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杭州师范大学,浙江杭州,310016
【出 处】
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中国环境诱变剂学会第七届全国会员代表大会暨第十七次学术大会
论文部分内容阅读
目的：探讨砷对THP-1巨噬细胞和L-02肝细胞胆固醇流出率及胆固醇流出通道基因ABCA1、ABCG1和SR-B1表达的影响,为阐明砷导致血脂异常及动脉粥样硬化的发生机制提供理论依据.
方法：THP-1巨噬细胞培养于RPMI1640培养基中,加入LXR/RXR激动剂(4μg/ml22R-OHC和10μmol/L9-cis-RA)预处理6h,随后加入终浓度分别为0.625、1.25、2.5和5μM的亚砷酸钠(NaAsO2)处理48h.2.5μM NaAsO2染毒THP-1细胞48h,并在不含砷条件下继续培养48h,分别于12、24、36、42、48、60、72、84、96h时收集细胞.L-02肝细胞培养于DMEM高糖培养基中,以2、4、6、8、10μMNaAsO2处理48h.12μM NaAsO2处理L-02细胞48h后,也在不含砷条件下继续培养48h,分别于12、24、36、42、48、60、72、84、96h后收集细胞,用定量PCR(qPCR)以及蛋白印迹(Western blot)技术检测ABCA1、ABCG1和SR-B1基因和蛋白表达水平;3H同位素示踪分析细胞内胆固醇流出率.
结果：NaAsO2可显著降低THP-1细胞内ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白水平,降低THP-1细胞内胆固醇流出率,对SR-B1的mRNA和蛋白水平的表达未见显著影响.去除砷12h后,细胞内ABCA1的表达量增加,36h后恢复到初始水平.NaAsO2可诱导L-02细胞ABCA1的表达量增加,增加胆固醇流出率,去除砷12h后,ABCA1的表达量降低,36h后ABCA1的表达量降低到初始水平.THP-1细胞和L-02细胞的胆固醇流出改变与ABCA1基因表达改变一致.
结论：砷对胆固醇的流出及相关基因表达的影响具有组织特异性,减少THP-1巨噬细胞胆固醇流出率及ABCA1、ABCG1表达,但增加L-02肝细胞胆固醇流出率及ABCA1、ABCG1表达.
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