Survivin基因RNA干扰联合15-脱氧-前列腺素J2治疗膀胱癌的实验研究

来源 :2012上海市医学会泌尿外科、男科学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:samdragon
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  目的:以膀胱癌T24、5637细胞为研究对象,观察Survivin基因RNA干扰与15-脱氧-前列腺素J2(15-Deoxy-12,14-Prostaglandin J2,15d-PGJ2)对细胞凋亡、Survivin蛋白水平及肿瘤细胞干性等方面的影响,检验及探讨两者联合是否具有更明显的抗肿瘤效应.方法:采用Survivin基因小分子干扰RNA转染T24、5637细胞、MTT检测不同浓度与时间梯度的15d-PGJ2对细胞的生长抑制效果、平板集落形成实验检测15d-PGJ2对细胞增殖能力的影响、流式细胞仪检测15 d-PGJ2对细胞周期的影响、流式细胞仪检测Survivin基因RNA干扰单独应用与联合15d-PGJ2对细胞凋亡率的影响、蛋白印迹检测Survivin基因RNA干扰与15d-PGJ2对细胞内Survivin基因表达的影响、成球试验检测Survivin基因RNA干扰单独应用及联合15d-PGJ2后对肿瘤细胞干性的影响.结果:(1)Survivin基因小分子干扰RNA可明显减少T24与5637细胞内Survivin基因的表达量;(2)0.5ug/ml的15d-PGJ2在长达6天的观测期内可对T24与5637细胞起到明显而持久的生长抑制作用(P<0.05);(3)平板集落形成实验表明0.5ug/ml的15d-PGJ2可明显降低T24、5637细胞的增殖能力;(4)15d-PGJ2对T24与5637细胞具有明显的细胞周期阻滞作用(G2/M期)(P<0.05);(5)经15d-PGJ2处理的T24、5637细胞内Survivin蛋白水平明显降低;(6)Survivin基因RNA干扰可增加T24、5637细胞的凋亡率,联合15d-PGJ2可进一步增加凋亡率(P<0.05);(7)15d-PGJ2可进一步增强Survivin基因小分子干扰RNA减少T24与5637细胞成球数的能力(P<0.05).结论:(1)Survivin基因RNA干扰与15d-PGJ2都可促进细胞凋亡并减少细胞内Survivin蛋白的水平,且15d-PGJ2还具有明显的生长增殖抑制作用及细胞周期阻滞作用(G2/M期).(2)Survivin基因RNA干扰联合应用15d-PGJ2可进一步促进T24、5637细胞凋亡并降低细胞成球能力.
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