【摘 要】
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目的：BM3突变体M01A82W、M01A82WS72I,M11A82W能够在不同的位点羟基化化睾酮和炔诺酮,因此使他们成为具有巨大潜能的羟基化甾体的催化剂.为了获得更多羟基化的甾体前体,很有必
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室/卫生部天然药物生物合成重点实验室,北京100050
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目的：BM3突变体M01A82W、M01A82WS72I,M11A82W能够在不同的位点羟基化化睾酮和炔诺酮,因此使他们成为具有巨大潜能的羟基化甾体的催化剂.为了获得更多羟基化的甾体前体,很有必要探究这些BM3突变体的底物多样性.
方法：3个纯化了的BM3突变体首先以睾酮,甲睾酮,胆固醇,β-谷甾醇,脱氢表雄酮,薯蓣皂苷元,孕烯醇酮和麦角甾醇等8种甾体为底物.为了进一步验证实验结果,又精心挑选了3个结构为3-羰基-4-双键的的甾体和2个结构为3-羟基-5-双键的甾体为底物进行催化反应.
结果：3种BM3突变体能够在不同的位点羟基化结构为3-羰基-4-双键的睾酮,甲睾酮、黄体酮、雄烯二酮和17α-OH黄体酮.相反,对8个结构为3-羟基-5-双键的甾体无任何催化活性.
结论：BM3突变体可能更偏爱3-羰基-4-双键的甾体,即它们的底物特异性.这些结果拓展了我们对BM3突变体的甾体底物杂泛性的了解,从而扩大其作为生物催化剂的综合应用.
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