【摘 要】
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目的：研究直接鉴定标本中病原菌16S rDNA的标本前处理和混合感染标本基因鉴定技术。方法：126份标本采用碱裂解法、miniMAG核酸提取试剂盒法、和本实验室开发的两步裂解法三种标本前处理方法，通过PCR检测比较不同前处理方法提取病原微生物16S rDNA的效率。PCR阳性产物纯化后测序，确定病原微生物的种属。混合感染采用分子克隆技术测序鉴定。同时应用传统细菌学检查方法对比基因测序鉴定结果。结果
【出 处】
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2008年微生物实用技术生态环境应用学术研讨会
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目的：研究直接鉴定标本中病原菌16S rDNA的标本前处理和混合感染标本基因鉴定技术。方法：126份标本采用碱裂解法、miniMAG核酸提取试剂盒法、和本实验室开发的两步裂解法三种标本前处理方法，通过PCR检测比较不同前处理方法提取病原微生物16S rDNA的效率。PCR阳性产物纯化后测序，确定病原微生物的种属。混合感染采用分子克隆技术测序鉴定。同时应用传统细菌学检查方法对比基因测序鉴定结果。结果：碱裂解法的PCR阳性率为23/126(18.3％)，mini MAG核酸提取试剂盒法的pCR阳性率为37/126(29.4％)，两步裂解法的PCR阿J性率为44/126(35.0％)。5例混合感染通过克隆测序鉴定。结论：改进的标本前处理方法和克隆测序技术的可提高直接鉴定标本中病原菌的基因的阳性率。
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