目的建立测定人肝微粒体孵育体系中氯吡格雷活性及其非活性代谢产物药物浓度的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法采用液液萃取法处理人肝微粒体孵育体系样本测定氯吡格雷活性及其非活性代谢产物药物浓度。色谱柱为ThermoC18柱(100mm×2.1mm,5μm)。流动相为乙腈(含0.1%甲酸):水(含0.1%甲酸)(9:1,V/V),流速为200μL·min-1。正离子模式多反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为氯吡格雷活性代谢产物m/z503.6→353.8;非活性代谢产物m/z307.7→197.8;内标氯雷他定m/z382.8→336.9。结果人肝微粒体孵育体系中氯吡格雷活性及其非活性代谢产物线性范围分别为1~200ng·mL-1和10~2000ng·mL-1,定量下限分别为1ng·mL-1和10ng·mL-1,回收率分别在59.36%~73.42%、54.79%~72.77%之间,氯吡格雷活性代谢产物的批内、批间精密度RSD均小于11.36%,非活性代谢产物的批内、批间变异均小于9.69%。氯吡格雷非活性代谢产物酶促反应动力学参数Km值为15.86±1.83μM,Vmax值为620.2±19.74pmol·min-1·mg-1protein,Clint值为39.15±2.06μL·min-1mgprotein-1;活性代谢产物生成开始随着底物浓度的增加而增加,在底物浓度为20μM时其生成量达到最大,随后随着底物浓度的增加其生成量并没有进一步增加。结论该方法操作简便快速,重复性好,特异性强,灵敏度高,可用于肝微粒体孵育体系中氯吡格雷活性及非活性代谢产物药物浓度的测定。