Site-directed Mutagenesis of Echistatin from RGDD Motif to KGDW Enhances the Inhibition of Platelet

来源 :泛环渤海地区(七省二市)生物化学与分子生物学会2010年学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heiyun28
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  The disintegrins are widely known as having an anticoagulant function,but the mechanism has not been fully characterized as of today.Using DNA recombination technology,the gene sequence encoding one kind of disintegrins,echistatin,was modified.This modification changed the original amino acids which were located at the 24th-27th site from RGDD to KGDW,and a mutant protein echistatin (AKGDWM) was obtained.Gene engineering technologies were used to express,isolate and purify the mutant protein echistatin (AKGDWM).
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背景:目前已从多种组织器官中分离出间充质干细胞,但如何更高效地获取高纯度的间充质干细胞仍是目前研究目标之一。目的:研究探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)体外高效培养的最佳方法,为脐带间充质干细胞在临床上的大规模应用奠定基础。设计、时间及地点:体外细胞培养对比实验,于2009-10/2010-03在山西医科大学生物化学和分子生物学实验室完成。材料:脐带标本取自健康足月剖宫产的新生儿,由山西医科大学第
目的:1.检测白桦脂酸抑制大肠癌细胞SW480的增殖与迁移能力以及相关增殖基因的表达情况.2.将肿瘤细胞SW480注入裸鼠体内使其局部成瘤,构建大肠癌模型.3.造模成功后检测白桦脂酸对大肠癌的治疗作用,为大肠癌治疗寻找新的思路.方法:1.白桦脂酸治疗SW480细胞后,提取总RNA及蛋白质,应用实时荧光定量PCR、Western blot检测其对转录因子特化蛋白1和血管内皮生长因子mRNA及蛋白质表
丙氨酸消旋酶(alanine racemase)(EC5.1.1.1)是以磷酸吡哆醛(PLP)为辅酶,催化丙氨酸的D型和L型的相互转化的一种酶,广泛分布于原核生物中,且在伤寒沙门氏菌、埃希氏菌属大肠杆菌、假单孢杆菌、霍乱肠弧菌和枯草芽孢杆菌中存在两种类型的丙氨酸消旋酶,分别被命名为DadB(DadX)和Alr. DadB (DadX)是诱导型表达并参与L-丙氨酸的分解代谢,而Alr是组成型合成,参
D-氨基酸归属于非天然氨基酸类.存在于细胞或组织中的D-氨基酸或其衍生物约有400多种,但它们的含量甚微,难于从细胞或组织中直接提取,一般都是化学合成或生物转化而得.D-氨基酸是制药、食品、日化、农药等领域的重要原材料之一,需求量呈逐年递增趋势.生物转化方法以其低消耗,高产率、高反应速率及温和的反应条件而成为工业生产的首选方法.它是利用2-3个专一性的酶进行顺序转化5-单替代海因而获得D-氨基酸,
环酰亚胺水解酶(cyclic imide hydrolase,EC.3.5.2.16)是环酰胺酶(包括海因酶、二氢尿嘧啶酶、二氢乳清酸梅、尿囊素酶等)中的一个亚类,也称酰亚胺酶(imidase).20世纪50年代,科学家从小牛肝脏中分离出以二氢尿嘧啶为底物的亚胺水解酶,并命名为二 氢尿嘧啶酶.但是,二氢尿嘧啶酶大部分作用于哺乳动物中亚胺类物质的水解,而在微生物中水解亚胺类物质的涉及到两个酶,一个是
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