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本研究根据牛轮状病毒(Bovino rotavirus，BRV)的NSP4基因序列，设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89，利用脂质体介导法，将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞，包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV，以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照，48h后与LacZ shRNA对照比较，RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明，针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明，在转染50％、75％、95％RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中，病毒滴度分别是对照组的50％、20％和1 0％.上述实验结果表明，针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因，并且能阻断牛轮状病毒增殖.