【摘 要】
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禽戊型肝炎病毒(avian hepatitis E virus,HEV)是最近在美国由患有肝脾肿大(hepatitis- splenomegaly,HS)综合症的鸡体内分离而得。HS 综合症是北美新出现的一种禽病。业已证明禽戊肝病毒是 HS 综合症的主要病源。禽 HEV 与人和猪 HEV 均属于肝病毒属。其基因组合近似于哺乳动物 HEV,尽管其基因组比哺乳动物的基因组少了600个碱基。已有报道戊肝
【出 处】
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第15届世界禽病大会、中国畜牧兽医学会2007年学术年会论文集
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禽戊型肝炎病毒(avian hepatitis E virus,HEV)是最近在美国由患有肝脾肿大(hepatitis- splenomegaly,HS)综合症的鸡体内分离而得。HS 综合症是北美新出现的一种禽病。业已证明禽戊肝病毒是 HS 综合症的主要病源。禽 HEV 与人和猪 HEV 均属于肝病毒属。其基因组合近似于哺乳动物 HEV,尽管其基因组比哺乳动物的基因组少了600个碱基。已有报道戊肝病毒在人类的垂直传播,但尚缺乏在动物中的报道。我们最新研究发现禽 HEV 存在于鸡蛋清样本。含有禽 HEV 的鸡蛋清样本可以感染鸡,产生病毒血症,抗体阳性,以及由粪便排毒。对由感染禽 HEV 的母鸡蛋孵出的雏鸡成长过程的检测中未在其体内发现禽 HEV。该实验的结果提示禽 HEV 不能进行垂直传播。另外,我们的前期研究结果表明基因重组禽 HEV 的 ORF2蛋白含有其独有的抗原表位,同时含有与人、猪 HEV 共有的抗原表位(Guo et al., J Gen Virol,2006;87:217)。同时证明免疫了基因重组禽 HEV ORF2蛋白的鸡群得到了免疫保护而不受禽 HEV 的感染(Guo et al.,Vaccine,2007;25:2892)。为了进一步分析基因重组禽 HEV ORF2蛋白的免疫保护作用,我们筛选出了四个单克隆抗基因重组禽 HEV ORY2蛋白的抗体以及由这四个单克隆抗体鉴定出的两个 ORF2蛋白的中和抗原决定簇表位。由竞争酶链免疫实验结果显示,单克隆抗体782,1E11和 10A2相互阻断其结合基因重组禽 HEV ORF2蛋白。而单克隆抗体5G10不能阻挡其它单克隆抗体结合 ORF2蛋白。说明单克隆抗体782,1E11,10A2识别相同或重叠的抗原决定簇,而单克隆抗体5G10识别一个不同的抗原决定簇。利用免疫印迹实验进行抗原决定簇表位定位,我们发现单克隆抗体782,1E11 和10A2识别的抗原决定簇位于氨基酸残基第513至570位。单克隆抗体5G10识别的抗原决定簇位于 476至513氨基酸残基间。研究结果进一步证实单克隆抗体1E11,10A2 and 5G10在体外结合禽 HEV 颗粒,而只有单克隆抗体5G10结合转染了禽 HEV 的 LMH 细胞。为了进一步评价这些单克隆抗体的中和作用,禽 HEV 与单克隆抗体在体外混合结合之后接种 SPF 鸡。结果发现单克隆抗体1E11,10A2或5G10可以诱导迟发的病毒血症和粪便排毒。由此推断这三个单克隆抗体部分中和了禽 HEV。综合以上研究结果推断禽可以作为一种有用的小动物模型,用于研究戊型肝炎病毒免疫学以及其致病机理。
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