油梨梢枯病病原菌的分离与鉴定

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油梨果实具有非常丰富的营养,对人们有很好的保健作用,深受人们的喜爱。而病害的危害是影响其大面积推广种植的限制因素之一。病害调查时,在海南儋州一家油梨种植园发现油梨梢枯病发生严重。本实验利用科赫氏法则分离鉴定油梨梢枯病病原菌,依据病原菌形态观察和分子鉴定技术鉴定病原菌种类,结果显示:经致病力鉴定验证,分离获得油梨梢枯病病原菌AL1809,该菌株形态鉴定为拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis sp.)真菌,该真菌菌落在PDA培养基上初期呈白色,后逐渐转变为淡黄色,分生孢子5个细胞,真隔膜,两端细胞无色,中间细胞榄褐色,顶生附着丝3根,其尺寸为(5.437~9.611)μm×(18.21~25.85)μm(n=40)。采用通用引物扩增该菌株的内转录间隔区序列(internal transcribed spacers region of ribosomal DNA,rDNA-ITS)、翻译延伸因子(translation elongation factor,TEF)序列、β-微管蛋白(beta tubulin-2-gene,TUB)基因部分序列构建系统发育树,结果表明,该病原菌与拟盘多毛孢属Pestalotiopsis longiseta菌聚为一类,进一步确定病原菌为拟盘多毛孢属Pestalotiopsis longiseta菌。本研究结果为该病害预防工作奠定基础。
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