【摘 要】
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目的：蜕皮激素受体(ecdysteroid receptor,EcR)是一种超家族核受体,它能与超气门蛋白USP组成异源二聚体复合物EcR/USP,调节20-羟基蜕皮酮(20E)的生物活性,进而调控昆虫的发育、变态及繁殖等生命过程.本研究旨在克隆荼尺蠖Ectropis oblique(Prout)EcR(Eo-EcR)的基因全长,并了解该基因的编码蛋白特征和时空表达模式,为阐明Eo-EcR的分子功
【机 构】
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福建省农业科学院茶叶研究所,福建福安355015
【出 处】
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福建省科协第十五届学术年会农业分会
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目的：蜕皮激素受体(ecdysteroid receptor,EcR)是一种超家族核受体,它能与超气门蛋白USP组成异源二聚体复合物EcR/USP,调节20-羟基蜕皮酮(20E)的生物活性,进而调控昆虫的发育、变态及繁殖等生命过程.本研究旨在克隆荼尺蠖Ectropis oblique(Prout)EcR(Eo-EcR)的基因全长,并了解该基因的编码蛋白特征和时空表达模式,为阐明Eo-EcR的分子功能和基于Eo-EcR为靶标杀虫剂研制莫定基础.
方法：通过RT-PCR方法并结合RACE技术,克隆茶尺蠖EcR的基因全长,通过生物信息学软件和在线网站分析荼尺蠖EcR的生物学特性,通过实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)技术比较茶尺蠖EcR在不同发育时期和不同组织中的相对表达含量.
结果：克隆并鉴定了一个茶尺蠖EcR基因(基因登入号为:KP869130.1),Eo-EcR全长2268bp,含有1728bp开放阅读框,能编码576个氨基酸.系统进化树和氨基酸同源性比对表明,Eo-EcR具有相对保守的进化特性,特别是与鳞翅目昆虫的保守性最高.三级结构模拟和功能结构域预测表明,Eo-EcR具有3个经典的结构模型并以α螺旋为主,功能位点单一且为C4型锌指结构.qRT-PCR结果表明,Eo-EcR在5龄、6龄幼虫和成虫期表达量较高,在其他龄期表达量变化不大.同时在前胸腺表达量最高,在血淋巴表达量最低.
结论：明确了Eo-EcR的核苷酸序列及编码蛋白特征,明确了Eo-EcR的时空表达特性.该研究结果为进一步研究Eo-EcR的分子功能和基于Eo-EcR为靶标杀虫剂研制莫定分子基础.
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