【摘 要】
:
本研究的目的是摸索出一套简单,高效的水牛胎儿成纤维细胞分离培养方法,建立稳定的细胞系。结果显示,组织块培养法培养原代成纤维细胞生长较慢,汇合形成单层的生长需12-14天,胰酶消化法培养的戍纤维细胞生长相对较快,8天可汇合形成单层;细胞传代培养后,增殖速度较快,2-3天就可汇合形成单层。细胞冷冻解冻后,存活率达70%-80%。通过绘制第四代水牛胎儿成纤维细胞的生长曲线发现,水牛胎儿成纤维细胞生长增殖
【机 构】
:
广西大学动物繁殖研究所,广西 南宁 530005
【出 处】
:
中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究的目的是摸索出一套简单,高效的水牛胎儿成纤维细胞分离培养方法,建立稳定的细胞系。结果显示,组织块培养法培养原代成纤维细胞生长较慢,汇合形成单层的生长需12-14天,胰酶消化法培养的戍纤维细胞生长相对较快,8天可汇合形成单层;细胞传代培养后,增殖速度较快,2-3天就可汇合形成单层。细胞冷冻解冻后,存活率达70%-80%。通过绘制第四代水牛胎儿成纤维细胞的生长曲线发现,水牛胎儿成纤维细胞生长增殖的滞留期为0-1天,对敬生长期为2-6天,平台期为6-8天。
其他文献
[目的]分析IGF-Ⅱ基因在松辽黑猪中的多态性。[方法]以46头健康松辽黑猪为实验材料,对猪IGF-Ⅱ基因进行PCR扩增,采用PCR-SSCP技术结合测序进行分析。[结果]发现松辽黑猪第9外显子存在第29507位C→A、第29729位A→T、第29731位T→C突变。X2检验表明,本实验中发现的多态位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。最小二乘分析结果显示:exon9突变位点不同基因型个
[目的]为进一步研究克隆到的鸭Mel1c新基因,我们对该序列进行特征分析,并对其功能进行预测,为Mel 1c基因的功能研究打下基础。[方法]从脑组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增Mel 1c基因cDNA序列,将其克隆到pMD18-T载体上,测序后利用多种软件进行序列分析。[结果]成功的克隆了鸭Mel 1c基因部分序列,序列长为850bp,其编码283个氨基酸;鸭Mel 1c部分序列与已报
本文叙述了采用热TRIzol法时牛精子进行总RNA的制备、检测和分析。结果表明:虽然通过琼脂糖凝胶电泳检测不到牛精子总RNA中的18S和28S rRNA,但是对总RNA进行RT-PCR检测结果显示:无论是以新鲜精子为实验材料,还是以冷冻精子为实验材料,热TRIzol法都成功的提取到的牛精子总RNA,且总RNA具有良好的完整性;总RNA提取前的裂解过程也能有效去除精子中的体细胞污染。由此可见,热TR
目的:探讨牛骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外定向分化为心肌样细胞。方法:通过贴壁筛选法分离培养牛MSCs,利用纯化稳定的第四代MSCs经5-氮杂胞苷进行体外诱导分化,并对诱导出现的心肌样细胞进行形态学观察和RT-PCR鉴定。结果:获得高纯度且增殖能力较强的MSCs,诱导后细胞大多呈梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成.RT-PCR显示诱导组细胞结蛋
雄性生殖系干细胞(male germ-line stem cells,mGSCs)是一群具有高度自我更新能力和分化潜能的细胞,是雄性成体内唯一可复制的二倍体永生细胞。转基因技术与雄性生殖系干细胞异体及异种移植技术相结合,将会为克隆动物、转基因动物生产及一些人类遗传性疾病的基因治疗提供新的机遇与途径。本试验采用组合酶消化和选择贴壁法,对5月龄、6月龄牛胎儿及新生牛雄性生殖系干细胞体外培养及分化进行了
胚胎干细胞在再生医学、农业及基础理论研究中都具有重要的生物学意义和广阔的应用前景,牛的胚胎干细胞作为核移植的优选供体细胞,在动物克隆和乳腺生物反应器研究中的意义也不容质疑。小鼠ES细胞的建系方法及培养体系已基本成熟,牛仿照小鼠ES细胞建系方法很难成功,如何克服牛ES细胞培养建系存在的问题,提供牛ES细胞生长增殖的适宜环境已成为研究牛乳腺生物反应器的关键因素。本文回顾了牛胚胎干细胞的研究进展,阐述了
本文介绍了胚胎干细胞的研究历史概况、特性、来源、培养体系、分离鉴定、体外分化等,阐明了建立ES细胞系的技术要点以及胚胎干细胞细胞存在的问题及发展前景。
[目的]极低接种密度条件对影响水牛胎儿成纤维细胞生长增殖和细胞集落形成的各种因素进行研究。[方法]分离单个水牛胎儿成纤维细胞,在培养液中添加不同成分或改变培养环境,统计细胞集落形成和生长指数的变化。[结果]低密度接种的水牛胎儿成纤维细胞总体细胞集落形成率低于20%;在培养液中添加适宜浓度的胰岛素对水牛胎儿成纤维细胞的增殖具有显著的促进作用,胰岛素对细胞的增殖作用与浓度呈正相关;培养液中添加不同浓度
以新生牛睾丸为实验材料,对精原干细胞进行分离纯化,体外培养和长期保存。结果表明:牛睾丸组织采用“0.1%胶原酶Ⅳ+0.15%透明质酸酶/0.25%胰蛋白酶”和“消化液Ⅰ+消化液Ⅱ”两步酶消化法,两种方法均获得了较高的细胞活率。DMSO、EG两种冷冻荆的最高细胞复苏率分别为88.78%、85.11%,DMSO的冻存效果优于EG,适宜浓度为10%.10%DMSO和10%EG冷冻液添加蔗糖冻存后复苏率分
[目的]建立奶牛输卵管上皮细胞(Oviduct epithelial cells,OECs)分离培养体系,研究OECs的生物学特性,以满足体细胞核移植时供体细胞和胚胎共培养滋养层细胞的需要。[方法]用EDTA消化及机械剪取的方法分离OECs,经传代纯化细胞.倒置相差显微镜下观察其生长特性。绘制纯化稳定后的OECs生长曲线,并分析其染色体核型。[结果]纯化的奶牛OECs,接种4-5 h后细胞贴壁,细