【摘 要】
：
目的 比较负载各种胶质瘤干细胞(GSC)全细胞抗原的树突状细胞(DC)在体外靶向杀伤胶质瘤干细胞的疗效.方法 磁珠分选CD133+的小鼠胶质瘤细胞系GL261干细胞(GSC),以冻融裂解法、凋亡细胞法和全RNA提取法提取GSC全抗原,并同步获取同源C57BL/6J小鼠的未成熟骨髓源性DC及脾脏T淋巴细胞并在体外维持培养.以上述各种GSC全抗原冲击致敏体外培养第5天的同源未成熟DC,即为冻融裂解组、
【机 构】
：
南方医科大学珠江医院神经外科,国家临床重点专科;广东省神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室 广州510282
【出 处】
：
广东省医学会第四届细胞治疗学学术会议
论文部分内容阅读
目的 比较负载各种胶质瘤干细胞(GSC)全细胞抗原的树突状细胞(DC)在体外靶向杀伤胶质瘤干细胞的疗效.方法 磁珠分选CD133+的小鼠胶质瘤细胞系GL261干细胞(GSC),以冻融裂解法、凋亡细胞法和全RNA提取法提取GSC全抗原,并同步获取同源C57BL/6J小鼠的未成熟骨髓源性DC及脾脏T淋巴细胞并在体外维持培养.以上述各种GSC全抗原冲击致敏体外培养第5天的同源未成熟DC,即为冻融裂解组、凋亡细胞组和全RNA组,并以未接受抗原刺激的DC和接受LPSS刺激的DC分别作为阴性及阳性对照组,分别命名为对照组和LPS组.24h后流式细胞术检测各组DC表面CD11c、CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达及TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10的分泌,并以CCK-8法检测各组DC刺激后的同源T细胞体外增殖情况,综合筛选出GSC致敏DC的最优方式,再以此最优方式同步获取普通贴壁GL261胶质瘤细胞(AGC)和胶质瘤干细胞(GSC)的全抗原,于第五天时致敏未成熟DC,分别为AGC-DC组和GSC-DC组；以未接受抗原刺激的DC和接受LPS刺激的DC分别作为阴性及阳性对照组,分别命名为单纯DC组和和LPS-DC组.致敏24h后以各组DC疫苗与同源T淋巴细胞共培养并行T淋巴细胞杀伤实验,计算各组DC疫苗诱导的T细胞分别对AGC和GSC的杀伤率.结果 在相同实验条件下,GSC致敏DC的最优方式为凋亡细胞法.此外,体外T淋巴细胞杀伤实验中发现：当杀伤靶细胞为贴壁胶质瘤细胞(AGC)时,GSC+GC瘤苗与AGC+DC瘤苗组杀伤率无显著差异(P=0.70)；当杀伤靶细胞为提纯的GSC时,GSC+GC瘤苗杀伤率显著高于AGC+DC(P＜0.001).结论 对致敏方式的优化和体外杀伤实验中靶细胞的选择能更明显地体现出GSC+DC疫苗相对于传统AGC+DC疫苗的优势.
其他文献
The classical method of human pluripotent stem cell (hPSC) differentiation occurred via embryoid body (EB) formation,but the most population methodology should be that some functional somatic cells ca
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗中枢神经系统(central nerve system,CNS)疾病的疗效已得到证实,但BMSCs移植后与宿主间皮层神经元之间相互作用的研究尚未见相关文献报道.目的初步探索BMSCs体外移植模型中BMSCs与皮层神经元间的相互作用.方法 联合大鼠BMSCs与皮层神经元建立共培养体外移植模型为
Background Microglia are the primary immunocompetent cells in brain tissue,and microglia-mediated inflammation is associated with the pathogenesis of various neuronal disorders.Recently,many studies h
Background: Cancer stem cells (CSCs) are demonstrated to be rise from a small subpopulation of primary cells,which are able to generate tumor cell populations and resistance to conventional cancer the
CXCL10 is a chemokine with potent chemotactic activity for immune and non-immune cells expressing its receptor CXCR3.Previous studies have demonstrated that CXCL10 is involved in myocardial infarction
Mesenchymal stem cells (MSCs) are ideal materials for tissue reconstruction and regeneration.Research has indicated that hypoxia benefits MSCs survival,but little is known about the underlying mechani
目的 检测脐带间充质干细胞重层化条件培养下上清液中生长因子群的变化,并应用于皮肤再生年轻化以及毛发再生.方法 采集足月健康剖腹产后的脐带,体外分离培养扩增脐带间充质干细胞,达到一定数量后,进行重层化培养,收集细胞mRNA及提取条件培养上清液,以实时定量PCR和Elisa检测细胞中多种生长因子的mRNA以及生长因子分泌水平的变化.上清液离心、过滤灭菌、冻存、分装备用.注射治疗区域进行表面麻醉后,以1
目的 为缩短心肌细胞片体外构建周期,维持骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)干细胞活性,本团队拟以脱细胞猪心包膜(Decellular porcine pericardium,DPP)为载体,动态灌注培养系统提供BMSC营养供应,为多层BMSC细胞片提供新的体外快速构建培养方案,观察BMSC细胞片对大鼠心梗模型心功能改善情况。方法 与新鲜
Method: The cytotoxic effect was determined by MTT assay.The cell apoptosis and cell cycle change was demonstrated by flow-cytometric analysis.The gene expression was detected by RT-PCR method.The mor