【摘 要】
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利用福尔马林灭活法制备了哈维氏弧菌疫苗,并以黄芪多糖作为佐剂,腹腔注射接种牙鲆?在第35天采取血样并检测抗体效价?于免疫后14天和35天取脾?头肾组织,提取mR NA,应用实时荧
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利用福尔马林灭活法制备了哈维氏弧菌疫苗,并以黄芪多糖作为佐剂,腹腔注射接种牙鲆?在第35天采取血样并检测抗体效价?于免疫后14天和35天取脾?头肾组织,提取mR NA,应用实时荧光定量PCR法检测2个组织中主要组织相容性复合体MHCⅠ和MHCⅡ?干扰素(IFN-γ)?白介素(IL)-6?白细胞表面受体(CD40)?Mx蛋白(Mx)和自然杀伤细胞增强因子(NKEF)这7种免疫相关基因的表达?第35天进行人工攻毒实验,测定免疫保护力。结果表明,黄芪多糖佐剂组和无佐剂组两组的抗体效价都在第35天达到2~7。定量PCR结果显示黄芪多糖佐剂疫苗引起各组织中7种基因表达显著上调,基因表达量最高值是对照组的2.2-32倍;黄芪多糖佐剂疫苗组基因的表达量显著高于无佐剂疫苗组?攻毒后黄芪多糖佐剂疫苗组的免疫保护率为80.2%,无佐剂疫苗组为74.4%?实验结果证明,哈维氏弧菌疫苗对牙鲆具有免疫作用,而且添加黄芪多糖佐剂组的免疫效果好于无佐剂组。
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