【摘 要】
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随着基因治疗及基因疫苗的不断发展,质粒的需求量迅速增加.本文以pcDNA3 为目的产物,考察了在其提取过程中硫酸铵和氯化钙的加入对pcDNA3收率的影响和对杂质的去除效果.实验
【机 构】
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天津工业大学应用化学系,天津300160,中国
【出 处】
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2006年绿色化学科学与工程和过程系统工程国际论坛
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随着基因治疗及基因疫苗的不断发展,质粒的需求量迅速增加.本文以pcDNA3 为目的产物,考察了在其提取过程中硫酸铵和氯化钙的加入对pcDNA3收率的影响和对杂质的去除效果.实验发现:硫酸铵和氯化钙的加入都可以明显降低质粒提取液中蛋白质、RNA杂质的含量;但是氯化钙在降低蛋白质和RNA含量的同时也降低了质粒DNA的收率.硫酸铵是去除蛋白质、RNA杂质的良好试剂,同时能够保持较高的质粒DNA收率.当质粒提取液中硫酸铵浓度加入到2.5 M时,质粒的纯化因子可达到10.2,而收率在90％ 以上。
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