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为建立快速检测鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)抗体的血清学方法,以及对鸭坦布苏病毒病进行血清流行病学调查,本研究以原核表达纯化的鸭坦布苏病毒ED3 蛋白为包被抗原,建立了检测鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA 诊断方法。
检测鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法与蚀斑减少中和试验的比较研究
【摘 要】
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为建立快速检测鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)抗体的血清学方法,以及对鸭坦布苏病毒病进行血清流行病学调查,本研究以原核表达纯化的鸭坦布苏病毒ED3 蛋白为包被抗原,建立了检测鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA 诊断方法。
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛
【发表日期】
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2013年11期
其他文献
马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)是引起家禽免疫抑制和肿瘤病最重要的病原之一,其早期感染宿主后可最终诱导感染鸡产生T 细胞淋巴瘤。至今,在MDV 编码的众多蛋白中,仅MEQ 蛋白被认为是MDV 的主要致瘤蛋白。
马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)和禽网状内皮增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)是导致家禽免疫抑制性疾病和肿瘤病最重要的两种病原。
会议
马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)是一种具有代表性的家禽疱疹病毒,它早期感染鸡后可快速导致宿主的T 淋巴组织增生性肿瘤病,即马立克氏病(Marek’s disease,MD)。
会议
为探索vp2 基因特异miRNA 对鸡传染性法氏囊病毒复制的抑制作用，笔者在前期研究基础上，将两个有效的vp2 基因特异miRNA 表达框分别克隆入含neo 基因的pTarget 载体中获得miRNA 单表达或双表达载体，重组载体转染DF-1 细胞后经G418 筛选、IBDV Lurket 株感染，通过半定量RT-PCR 法、病毒滴定法分别检测vp2 基因转录子的表达情况与细胞上清中的病毒TCID
根据大肠杆菌密码子使用频率,我们首先对IBD强毒分离株VP2基因进行改造并合成,命名为mVP2,然后选用含温度诱导型启动子PR PL的原核表达载体pBV220和融合表达型原核表达载体pET-32a,构建含密码子优化型IBDV VP2基因的原核表达质粒pET32- VP2和pBV220-VP2,收集诱导菌体。
会议
以传染性法氏囊病病毒(IBDV)病毒样颗粒(VLP)重组VP2蛋白免疫BALB/c小鼠，制备了七株分泌抗IBDV单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞。
会议
为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2 融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF 鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2 融合蛋白同时接种21 日龄SPF 鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV 排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检
为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理，本研究将40 只7 日龄健康SPF 鸡随机平均分为4 组以进行rChIL-6 蛋白对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验，于14 日龄时进行免疫接种和rChIL-6 蛋白注射。
为研究鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白的免疫原性,本试验构建了表达质粒pET32a-E,表达的E蛋白大小约为48KD,Western-blot 分析表明该蛋白能与DTMUV阳性血清产生特异性反应。
根据鹅坦布苏病毒JS804 株非结构蛋白NS1 基因序列,设计一对特异性引物,利用PCR 方法扩增得到完整的NS1 基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a 和pET32a 上,构建出重组表达质粒pET28a-NS1和pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中,经IPTG 诱导得到NS1 融合蛋白(His-NS1),其分子质量约分别为44kD 和58kD,均在诱导后6h 达到表达量高峰。
会议