【摘 要】
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背景与目的:人类肿瘤抗原MAGE-A4(melanoma antigen-A)家族与肿瘤的发生有着密切的关系,本研究通过转染人类MAGE-A4小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),探讨其对人类乳腺癌
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背景与目的:人类肿瘤抗原MAGE-A4(melanoma antigen-A)家族与肿瘤的发生有着密切的关系,本研究通过转染人类MAGE-A4小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),探讨其对人类乳腺癌细胞MDA-MB-436的MAGE-A4表达及凋亡的影响。方法:采用LipofectamineTM RNAiMAX转染试剂将人类肿瘤抗原MAGE-A4 siRNA寡核苷酸转染至高表达MAGE-A4的人类乳腺癌细胞系MDA-MB-436中,用RT-PCR及Western blot分别检测MAGE-A4 mRNA及蛋白的表达;应用TUNEL染色、流式细胞分析技术及检测PARP的裂解状况来确定MAGE-A4 siRNA对MDA-MB-436细胞凋亡的影响。结果:MDA-MB-436细胞成功转染30pmol和60pmol MAGE-A4 siRNA 48h后,与对照组相比,其mRNA表达抑制率分别达到87.5%与97.5%,蛋白表达抑制率分别达到82.6%与99.9%。转染MAGE-A4 siRNA并用顺铂(20μmol/L)处理细胞12h和24h,凋亡细胞数(2±1和12±1)与阴性对照组(9±1和56±1)相比明显减少(P<0.05。顺铂(20μmol/L)处理24h后,实验组subG.(4.68±0.04)%与对照组(10.88±0.11)%相比明显下降(P<0.05)。PARP蛋白的裂解程度(0.129±0.014)与对照组(0.549±0.023)相比显著降低(P<0.05)。结论:MAGE-A4 siRNA可显著下调MDA-MB-436细胞中该基因mRNA和蛋白的表达,在一定程度上降低该细胞响应凋亡的能力。
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