【摘 要】
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我国是南美白对虾的主产国.对虾加工过程中会产生大量的虾头下脚料,这些下脚料中含有各种营养成分和高活性的酶,因此,对下脚料的高效利用尤为重要.本研究从南美白对虾虾
【机 构】
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集美大学生物工程学院 福建 厦门 361021
【出 处】
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中国食品科学技术学会第八届年会暨第六届东西方食品业高层论坛
论文部分内容阅读
我国是南美白对虾的主产国.对虾加工过程中会产生大量的虾头下脚料,这些下脚料中含有各种营养成分和高活性的酶,因此,对下脚料的高效利用尤为重要.本研究从南美白对虾虾头下脚料中分离纯化了一种高活性的丝氨酸蛋白酶.纯化方法包括硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200 HR凝胶过滤层析和DEAE Sepharose-Fast Flow阴离子交换层析等.SDS-PAGE结果显示该酶分子量约为28 kDa.酶的最适温度为40℃,最适pH为9.0,在45℃以下、pH 6.5-11.0之间该酶较稳定.底物特异性实验结果表明,该酶对胰蛋白酶底物Boc-Phe-Ser-Arg-MCA等有较高的分解作用,对P1位为Arg-的底物的分解能力比Lys-的底物更强.丝氨酸蛋白酶抑制剂Pefabloc SC、MBTI、Benzamidine、STI等都能有效抑制该酶的活性.该酶的N末端序列为IVGGT DAKPGELPYQLSFQDI,肽指纹图谱结果显示该酶与旗鱼胰蛋白酶(gi|136429)有58个氨基酸同源性达到100％.动力学实验显示,该酶对Boc-Phe-Ser-Arg-MCA荧光底物的亲和力最强,Km为0.96μmol/L,kcat为261.4 S-1,kcat/Km为2.73×108(mol/L)-1S-1.本研究为高值化利用水产加工下脚料提供了理论依据.
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