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目的:尝试RNAi(RNA interference)方法沉默猪源细胞系PK-15细胞中的PERV(Porcineendogenous retrovirus),并通过反转录酶活性及pol基因QPCR检测评价沉默效果。方法:依据GcnBank公布的PERV病毒pol基因序列,采用Ivitrogen公司的BLOCK—iTTMRNAiDesigller软件设计Stealth siRNA序列。合成的siRNA转染PK-15细胞,转染72h后检测细胞上清PERV病毒反转录酶活性及细胞内PERV病毒pol基因拷贝数并评价沉默效果。结果:反转录酶活性及pol基因拷贝数检测结果表明,设计的3条Steal也siRNA序列中位于pol基因3272-3296bp的序列能有效沉默PERV病毒。结论:RNAi方法可有效使猪源PK-15细胞中的PERV病毒沉默,为进一步研究天然抗病毒分子(如APOBEC3F)与PERV的相互作用提供了实验基础,同时也为猪源移种移植研究PERv生物安全性提供了一种可供尝试的方法。