孤雌胚胎干细胞向肌腱样细胞诱导分化研究

来源 :第六届全国组织工程与再生医学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:thiscf
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胚胎干细胞具有多向分化潜能,但在应用时存在一定的伦理道德问题.孤雌胚胎干细胞(pESCs)是通过直接激活MⅡ期卵子获得的,由于不能发育成个体,避免了相应的社会问题.首先将孤雌胚胎干细胞诱导分化为间充质干细胞,进一步诱导分化为肌腱样细胞,进行肌腱再造.方法:通过RT-PCR和免疫组织化学检测SSEA-1、SSEA-3及Nanog、 OCT4,并通过体内植入检测pESCs的全能性.制备拟胚体,贴壁培养,获取pESCs来源的MSC,real-time PCR检测轴中胚层、脊索旁中胚层、间介中胚层、侧中胚层的细胞标志变化,RT-PCR检测上皮、肌肉、造血等标志,流式细胞术及免疫组织化学检测细胞表面抗原.体外将其诱导分化为骨、软骨、脂肪并进行验证.将MSC进一步分化为肌腱样细胞,接种于PLGA三维支架材料,进行肌腱再造.
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