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建立日本血吸虫感染C57BL/6小鼠模型,于感染5-6周后剖杀,无菌制备肺细胞悬液,计数后,使用细胞表面染色的方法,利用流式细胞术检测γδT细胞百分比含量和绝对数目的变化,以及γδT细胞表面多种表面分子的表达;为了进一步了解感染过程中γδT细胞分泌多种细胞因子的能力,在体外用刺激剂PMA加Ionomycin共同培养肺细胞5个小时,然后用细胞内细胞因子染色和流式细胞术检测IL-4,IFN-γ,IL-17,IL-21,IL-10,IL-5,IL-2,GM-CSF,IL-1和IL-6的分泌情况;为确定γδT细胞在感染过程中的具体作用,使用日本血吸虫同时感染正常和γδTCR基因敲除小鼠。5-6周以后,使用流式细胞术和ELISA等方法,观察γδT细胞敲除对肺脏T细胞和B细胞含量、活化及功能的影响。结果表明,小鼠感染日本血吸虫后,肺脏γδT细胞的绝对数目明显增加,尽管其百分比含量没有明显变化。从表面分子的表达可以看出,感染后γδT细胞略活化,MHCⅡ和CD80的表达也有上调,提示γδT细胞可能也是一种抗原提呈细胞。与正常小鼠相比,感染小鼠肺脏γδT细胞能分泌更多的IL-4,IL-10,IL-21和IL-6,并减少IFN-γ和IL-17的分泌,这提示γδT细胞在感染过程中发挥了一定的作用。另外,与感染小鼠相比,γδT细胞敲除对T细胞和B细胞的百分比含量没有明显影响,CD3~+T细胞的绝对数目减少,但B细胞的绝对数目没有明显变化;对T细胞的活化和功能都没有显著影响,这提示γδT细胞与T细胞之间可能没有直接关联,而B细胞上CD80的表达却明显降低;CD3+CD28刺激下,肺细胞产生IL-4的量减少,不刺激组、SEA+CD28组和SWA+CD28组,肺细胞产生IFN-γ的量也减少。两组感染小鼠中,γδT细胞敲除之后,SEA特异性IgG的量减少,而SWA特异性IgG的量没有变化,这提示γδT细胞可能促进了SEA特异性IgG的产生。总而言之,本研究发现C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后肺脏γδT细胞的表型和功能均发生改变,γδT细胞能明显影响T、B淋巴细胞的功能。我们的研究结果提示γδT细胞在日本血吸虫感染诱导肺部病变的过程中发挥了重要的作用。