针刺与热灸不同刺激手法对小鼠足三里穴区皮肤肥大细胞和伤害性神经肽表达的影响

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目的:观察针刺与热灸不同刺激方式对小鼠足三里局部穴区启动物质,如:肥大细胞、5-羟色胺、组胺、降钙素基因相关肽、P物质、瞬时受体电位通道香草醛亚型-1的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、针刺组、热灸组,每组5只;雄性TRPV1基因敲除小鼠随机分为正常组、针刺组、热灸组,每组5只,用于免疫荧光检测。适应性喂养一周后进行试验,采用针灸针,给予C57BL/6针刺组与TRPV1-/-针刺组,手刺足三里刺激,持续时间5min;采用热灸仪,给予C57BL/6热灸组与TRPV1-/-热灸组,足三里温热刺激,持续时间30min。分析针刺与热灸前后对C57BL/6及TRPV1-/-小鼠足三里穴区皮肤MC、5-HT、HA、CGRP、SP、VR1的表达。结果:与C57BL/6空白组相比,C57BL/6小鼠针刺组与热灸组足三里穴区肥大细胞数量明显增多,且同时存在肥大细胞聚集及脱颗粒现象,而热灸组脱颗粒明显优于针刺组(P<0.05)。与TRPV1基因敲除小鼠空白组相比,TRPV1-/-小鼠针刺组与热灸组足三里穴区肥大细胞数量有增多,针刺组肥大细胞聚集明显,而热灸组以穴区肥大细胞脱颗粒为主要表现;但均明显低于C57BL/6小鼠组针刺与热灸后(P<0.05)。与C57BL/6小鼠、TRPV1基因敲除小鼠空白组对比,针刺与热灸C57BL/6小鼠、TRPV1基因敲除小鼠足三里可以促进穴区局部皮肤5-HT和HA释放,并向血管周围聚集;同时使伤害性神经肽CGRP、SP、VR1阳性纤维表达升高,并向血管及毛囊周围聚集(P<0.05)。而TRPV1基因敲除小鼠5-HT、HA、CGRP、SP、VR1表达较C57BL/6小鼠相对较少,尤其VR1表达明显下降(P<0.05)。结论:针刺与热灸起效关键是引起穴区局部皮肤相关化学物质高表达,激活皮肤中的神经-内分泌-免疫系统,通过神经递质传导至中枢,在由中枢调配从而达到防病治病的目的。然后针刺与热灸属于两种不同刺激方法,所以对穴区局部化学物质的表达存在差异,热灸后局部化学物质主要聚集在表皮下,范围广;针刺后局部化学物质主要聚集在真皮或皮下组织中,范围窄。
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