【摘 要】
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【目的】:通过原核表达获得埃博拉病毒特迪瓦型的核蛋白,并将蛋白纯化。【方法】:将合成的埃博拉病毒科特迪瓦型核蛋白基因亚克隆入原核表达质粒pET-28(a)中,构建重组表达质
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室; 河北工程大学农学院;
【基金项目】
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公益性行业(农业)科研专项经费“非洲猪瘟等重要外来动物疫病综合防控技术研究”(200903037-06)
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【目的】:通过原核表达获得埃博拉病毒特迪瓦型的核蛋白,并将蛋白纯化。【方法】:将合成的埃博拉病毒科特迪瓦型核蛋白基因亚克隆入原核表达质粒pET-28(a)中,构建重组表达质粒pET-28(a)-C-NP,并将重组质粒用热休克方法转化BL21(DE3)感受态细菌,以IPTG诱导蛋白表达,以SDS-PAGE分析表达形式及表达量,并用利用His-BandNi+柱进行亲和层析纯化。【结果】所构建的重组表达质粒pET-28(a)-C-NP序列正确。以1.0mmol/LIPTG37℃诱导6h,破菌沉淀中有目的蛋白表达。【结论】成功表达并纯化了埃博拉病毒科特迪瓦型核蛋白,为后续研究奠定了基础。
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