【摘 要】
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L-叔亮氨酸(L-tert-leucine,L-Tle)是一种非蛋白原的手性氨基酸,在抗癌药、抗艾滋药、手性助剂和配体的合成中具有广泛的应用.本文构建了重组菌E.coli BL21(DE3)/LeuDH-FDH,实现了亮氨酸脱氢酶(LeuDH,来源于Bacillus sphaericus CGMCC 1.1677)和甲酸脱氢酶(FDH,来源于 Candida boidinii)在E.coli中的共
【机 构】
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南京工业大学 生物与制药工程学院,江苏 南京,211800 南京工业大学 浦江学院,江苏 南京,2
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L-叔亮氨酸(L-tert-leucine,L-Tle)是一种非蛋白原的手性氨基酸,在抗癌药、抗艾滋药、手性助剂和配体的合成中具有广泛的应用.本文构建了重组菌E.coli BL21(DE3)/LeuDH-FDH,实现了亮氨酸脱氢酶(LeuDH,来源于Bacillus sphaericus CGMCC 1.1677)和甲酸脱氢酶(FDH,来源于 Candida boidinii)在E.coli中的共表达;研究了重组E.coli细胞破碎液催化三甲基丙酮酸(TMP)氨化还原制备L-Tle的反应工艺,考察了pH、温度、甲酸铵浓度、TMP浓度、细胞浓度及NAD+浓度等因素对反应的影响,优化了反应工艺条件.在优化后的条件下,即TMP 0.75M,甲酸铵1.50M,重组E.coli细胞30g/L,NAD+0.25g/L,pH8.5,30℃,反应15h后转化率和ee值均大于99%,时空产率为157gL-1d-1.进一步采用流加底物的方式提高了底物浓度和反应效率,TMP终浓度可达1.5M,反应6h转化率和ee值均大于99%,时空产率高达786g L-1d-1,是已报道工艺的2.1-7.2倍[1-2].反应工艺放大至1L反应体系后可稳定运行,显示了良好的工业化应用前景.
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研究了平面射流在周期性激励下的发展变化.在平面射流出口处放置了一对关于主流中心线对称的合成射流激励器,通过激励器产生不同频率不同幅度的周期性激励增强了气流的混合.
选用满足Mises屈服条件的的LY12铝合金材料样品,在霍普金森杆实验系统上对LY12铝样品施加不同程度的被动围压,研究围压对材料本构测试结果的影响.
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