目的:肝细胞生长因子(HGF)能够促进正常肝组织再生,但其对肝癌的作用尚存在争论。本研究观察HGF能否诱导肝癌HepG2细胞发生上皮细胞间质转化(EMT)及对其侵袭能力的影响。探讨其是否适用于肝癌术后的常规治疗,寻找肝癌进展的可能机制及潜在的治疗靶点。 方法:将HepG2细胞系分为4组:对照组、HGF组、COCl2组、HGF +Cocl2 组。分组干预36小时后,倒置显微镜下观察细胞形态学改变。Western-blot技术检测上皮细胞表面标记E-cadherin,间质细胞表面标记Vimentin、HGF受体C-met的表达变化。分组干预24小时后,Transwell侵袭实验检测HepG2细胞体外侵袭能力的变化,下室细胞数量分别用结晶紫染色后倒置显微镜镜下观察和MTT法检测。 结果:分组干预36小时后,对照组细胞连接紧密,排列规则,呈多边形。Cocl2 组细胞排列稍见松散,呈岛屿状排列、成团生长。HGF组细胞排列松散,细胞间黏附减弱、未见成团现象;细胞形态变为梭形(类似成纤维细胞形态特点)。HGF+Cocl2组细胞排列更加散乱,形态变为长梭形,多数细胞有明显伪足生长,细胞间缺少联系,彼此分离趋势明显。分组干预36h后,HGF 组、HGF+Cocl2组与对照组相比E-Cadherin表达水平下降而Vimentin 表达水平增高。HGF+Cocl2 组与HGF。组相比,E-cadherin、Vimentin表达水平的变化更加明显,表明此时HepG2细胞已发生上皮表型向间质表型的转化,并且缺氧可加剧这一转化现象。Cocl2组和HGF+Cocl2组C-met表达明显上调,说明C-met受体上调可能与缺氧有关。分组干预24小时后,Transwell 小室底膜下室测结晶紫染色,可见HGF组和HGF+Cocl2组细胞下室密度明显高于对照组。对照组和Cocl2组之间未见明显差别。而HGF+Cocl2下室细胞密度高于HGF组。提示HGF诱导HepG2细胞侵袭能力增强,而缺氧可加强HGF这一诱导作用,且缺氧本身并不直接影响HepG2细胞的侵袭能力。MTT法对下室细胞活力检测结果与镜下观察一致。 结论:HGF能够诱导肝癌HepG2细胞发生EMT,增加其侵袭转移的能力,故临床上不建议用HGF对肝癌切除术后或肝癌肝移植术后患者进行常规治疗。手术应激、介入栓塞等治疗以及肿瘤组织内部的相对缺氧状态使肝癌细胞对HGF的敏感性提高,此时内源性的HGF分泌可能是肝癌进展的机制之一。阻断HGF及其受体C-met的作用,可能成为肝癌治疗的潜在靶点,从而改善肝癌患者的远期预后。