【摘 要】
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对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)是一种对对虾养殖业造成巨大威胁的病毒,对国内养殖业造成巨大的经济损失.目前并没有有效治愈该病毒病的方法.WSSY
【机 构】
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黄海水产研究所,中国水产科学院,青岛,266071
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对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)是一种对对虾养殖业造成巨大威胁的病毒,对国内养殖业造成巨大的经济损失.目前并没有有效治愈该病毒病的方法.WSSY的特点是宿主范围广,组织嗜性高和致病力强.近年的研究表明WSSV结构蛋白包括囊膜蛋白、核衣壳蛋白和夹层蛋白.其中VP24为核衣壳蛋白,与VP26、VP28具有很高的同源性.根据GenBank上WSSV-vp24序列,采用Primer 5.O软件设计合成引物,PCR扩增得到vp24,vp26基因,与pBAD/gIIIA载体连接,通过菌落PCR、重组质粒双酶切以及测序对重组质粒进行筛选和验证,构建重组表达载体pBAD/gIIIA-VP24并转化大肠杆菌E.coli.用L-阿拉伯糖诱导重组基因工程菌,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测显示与预期大小(25.6kDa)相符合的目的蛋白.采用Co2+亲和层析的方式进行蛋白的纯化,所得蛋白纯度达到95％以上.将纯化的WSSV-VP24蛋白对小白鼠进行皮下注射免疫,制备多克隆抗体.ELISA法测得VP24抗体效价为1∶800.
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