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匹诺塞林属于黄酮类化合物,具有很好的生物活性.2009 年,匹诺塞林消旋体被SFDA 批准为Ⅰ类注射新药,主要用于治疗急性脑卒中,现已经进入Ⅱ期临床试验研究阶段.匹诺塞林可以通过化学合成、植物提取和合成生物学技术制备.通过合成生物学技术制备匹诺塞林具有绿色环保、能可持续发展的优点,是未来天然药物制备的主要方式之一.本研究从虎眼万年青中克隆得到参与匹诺塞林生物合成相关的3 个基因家族:对香豆酸辅酶A 连接酶、查尔酮合酶和查尔酮异构酶.通过体外酶促反应,从中筛选出具有酶学活性的基因成员.然后以这些基因作为元件构建不同的合成模块,将这些合成模块导入大肠杆菌,构建能制备(2S)-pinocembrin的大肠杆菌工程菌.结果表明,构建的大肠杆菌工程菌能产生(2S)-pinocembrin.本实验为下一步通过优化条件,获得工业化生产所需菌株奠定了基础.