黄芩苷对HCMV感染的HEL细胞凋亡的影响

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwertyuiop325
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目的:研究黄芩苷对人巨细胞病毒(HCMV)诱导的人胚肺(HEL)细胞凋亡的影响.方法:1用Annexin V/PI双染色流式法细胞凋亡检测试剂盒测定HEL细胞在高低感染复数(MOI分别为2.5、0.25)HCMV感染后24h,48h,72h,96h的凋亡细胞比率;大小剂量黄芩苷(20μg/ml、10μg/ml)处理的模拟感染组及高低感染复数组分别于感染后24h,48h,72h,96h的凋亡细胞比率.2用Western-blot法检测HEL细胞在感染高感染复数(MOI为2.5)HCMV 36h,48h,60h,72h,84h后pro-caspase-3的表达情况;及大小剂量黄芩苷处理的感染高感染复数(MOI为2.5)HCMV的HEF细胞72h后pro-caspase-3的表达情况,并与模拟对照组和感染对照组细胞比对分析.结果:1模拟感染组凋亡细胞比率维持在恒定的低水平;大小剂量黄等昔处理的HEL细胞凋亡细胞比率均出现小幅上抬,且高剂量组较低剂量组凋亡细胞比率稍高,但与同时间模拟对照组差别无统计学意义;感染高低感染复数的HEL细胞凋亡细胞比率总体趋势为随感染时间延长而增加,峰值分别为:低感染复数组96h达峰值(28.75%),但高感染复数组72h达峰值(36.36%),96h出现凋亡细胞比率的下调(31.17%)。大小剂量黄芪苷处理感染细胞后表现出较强细胞保护功效,除黄芪苷处理的高感染复数组96h出现凋亡细胞比率上调外,其余各感染组在黄芪苷处理后凋亡细胞比率均出现下降,且表现为剂量依赖性,与同时间感染对照组差别有统计学意义。2 HEL细胞感染高感染复数HCMV后pro-caspase-3随感染时间延长表达量先增多后逐渐降低,于感染后72h达最低值;大小剂量黄芪苷处理的高感染复数组,pro-caspase-3表达量均较未处理前稍增多,以高剂量处理组更为显著,与感染对照组具有统计学差异。结论:HCMV是HEL细胞凋亡的强诱导剂,随感染复数增加及感染时间延长细胞凋亡逐渐增加,其机制可能与影响pro-caspase-3表达水平相关;黄芪苷体外具有直接抗HCMV效应,并具较强抑制感染细胞凋亡的功效,拮抗pro-caspase-3的活化可能是其机制之一。
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