【摘 要】
:
本研究用2个不同亚型的AIV感染Madin-Darbycaninekidney(MDCK)细胞,通过观察细胞病变、红细胞凝集实验、间接免疫荧光等探讨不同致病力禽流感病毒(AIV)在MDCK细胞上的生长特
【机 构】
:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
【出 处】
:
中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
论文部分内容阅读
本研究用2个不同亚型的AIV感染Madin-Darbycaninekidney(MDCK)细胞,通过观察细胞病变、红细胞凝集实验、间接免疫荧光等探讨不同致病力禽流感病毒(AIV)在MDCK细胞上的生长特性;同时取这2株不同浓度(10-2~10-7)AIV在MDCK上培养72h的细胞培养上清0.1mL接种于9~11日龄鸡胚尿囊腔,37℃孵育48h~72h,无菌收获尿囊液,再做红细胞凝集实验.结果显示:这2个亚型AIV感染MDCK细胞后,血凝价(HA)最高为27,表现为较低的红细胞凝集活性,高致病力禽流感病毒(HPAIV)红细胞凝集活性较低致病力禽流感病毒(LPAIV)出现的要早一些;上述2个亚型AIV的MDCK培养上清接种鸡胚48~72h后,HA较高,在25.5~210之间,而且HPAIV-A/Goose/Guangdong/1/96高于LPAIV-A/Turkey/England/N28/73.这2株AIV均可致MDCK细胞发生病变,但病变程度和病变出现的时间不同,A/Goose/Guangdong/1/96[H5N1]感染MDCK细胞后3d可见明显病变,A/Turkey/England/N28/73[H5N2]感染MDCK细胞后4~5d可见明显病变;2个亚型不同浓度(10-2~10-7)AIV的间接免疫荧光结果均为阳性.以上结果表明HPAIV和LPAIV可致MDCK细胞病变,但红细胞凝集活性较低,接种鸡胚后红细胞凝集活性显著提高.
其他文献
以H7N2亚型禽流感病毒分离株A/Chicken/Hebei/01/03(H7N2)(HB103)作为免疫原,浓缩纯化后免疫BALB/C小鼠,三次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,融合阳性细胞用血凝抑
本文首先对猪繁殖与呼吸综合征的症状进行了概述,然后介绍了猪繁殖与呼吸综合征的常规疫苗以及基因工程疫苗,最后介绍了我国猪繁殖与呼吸综合征现状及防制难点。
1株针对禽流感病毒的单克隆抗体标记胶体金颗粒,另一株包被于硝酸纤维素膜上,建立检测禽流感病毒的胶体金免疫层析法检测试纸条(ICS).同时应用ICS和HA试验检测尿囊液,结果当H
基于目前已知禽流感病毒基质蛋白、血凝素、神经氨酸酶基因,研究建立了A型、H5、N1、H9、N2亚型特异性RT-PCR及H5/N1、H9/N2、A/H5/N1多重RT-PCR检测技术,用于检测或同时检测
建立简便的一步法RT-PCR检测方法,对禽流感病毒(AIV)的血凝素(HA)分型进行了研究.参照AIV的HA基因序列设计了1对引物,对H9和H5亚型AIV的扩增产物大小分别为579bp和177bp,很容
将H5N1亚型禽流感病毒NS1基因插入到杆状病毒转移载体pFastBac1中,获得重组转移载体pFastBac1-NS1.将pFastBac1-NS1转化到DH10Bac感受态细胞中,筛选到重组转座子rBacmid-NS1.
参考AIVM基因和HA基因序列,设计了四对引物,其中一对为针对不同HA亚型AIV的通用引物,另外为三对分别针对H5、H7和H9亚型AIV的特异性引物.这些引物所扩增的cDNA片段大小分别为
针对新城疫病毒(NDV)F基因保守区内的核苷酸序列设计1对引物,用此对引物和标准NDV毒株(含NDV强毒和弱毒)的RNA为模板,建立并优化SYBRGreenⅠ模式荧光RT-PCRNDV检测方法.待测
鹅源新城疫已经成为危害养鹅业的又一主要病毒性疾病.国内许多学者认为鹅源新城疫类似于鸡新城疫病毒,本试验通过对2株本病病原的初步生物学特性研究和分子流行病学分析,具体
以纯化的禽流感(AIV)核蛋白作为捕捉抗原,金标兔抗鸡抗体作为金标二抗,建立检测禽流感血清抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS).对标准阳性血清不同滴度进行检测,ICS试验的敏感