【摘 要】
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目的 微小RNA(microRNA,miRNA)是近几年在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码单链小分子RNA,其大小长约19-23个核苷酸,能够以碱基不完全互补的方式与靶基因结合,在转录后水平上对靶基因进行负向调控.作为重要的调节分子,miRNA参与了充质干细胞(MSCs)的增殖、分化、迁移以及细胞因子的分泌等一系列重要的生理和病理过程.本研究利用miR-155抑制剂或其类似物转染骨
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目的 微小RNA(microRNA,miRNA)是近几年在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码单链小分子RNA,其大小长约19-23个核苷酸,能够以碱基不完全互补的方式与靶基因结合,在转录后水平上对靶基因进行负向调控.作为重要的调节分子,miRNA参与了充质干细胞(MSCs)的增殖、分化、迁移以及细胞因子的分泌等一系列重要的生理和病理过程.本研究利用miR-155抑制剂或其类似物转染骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),观察miR-155对BM-MSCs迁移能力的影响.方法 从健康志愿者骨髓中分离培养BM-MSCs,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达.利用miR-155抑制剂或其类似物转染BM-MSCs,qRT-PCR检测转染后各组细胞miR-155的表达.迁移实验测定转染后各组细胞的BM-MSCs的迁移能力,了解miR-155对BM-MSCs迁移活性的影响.结果 1.BM-MSCs表面表达CD29、CD44、CD49e、CD90、CD105和CD166,不表达CD14、CD34、CD31、CD45和HLA-DR,符合MSCs的形态和表型特征.2.利用miR-155抑制剂或类似物转染BM-MSCs后,细胞miR-155表达量出现相应的下调或上调,与对照组相比,转染miR-155抑制剂后细胞miR-155表达下调(P<0.01),而转染miR-155类似物后细胞miR-155表达显著上调(P<0.01).3.迁移实验中,与对照组相比,转染miR-155抑制剂组的细胞趋化指数(实验组5个高倍镜下细胞数/空白对照组5个高倍镜下细胞数)显著升高(P<0.01),而转染miR-155类似物组细胞趋化指数显著降低(P<0.01).结论 miR-155可显著抑制BM-MSCs的迁移能力,但具体机制还有待进一步研究.
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