【摘 要】
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假单胞菌PC60是本实验室从小麦根围分离得到的对小麦赤霉病菌有显著抑制作用的生防细菌.基因组测序结果显示,该菌株基因组大小为6.82M,共编码6 162个蛋白,GC含量62.8％,系统进化树结果表明,PC60为绿针假单胞菌.研究通过次生代谢基因簇预测、突变体构建并结合活性物质分离、鉴定,明确了PC60抑制赤霉病菌的活性化合物为吩嗪-1-甲酰胺(phenazine-1-carboxamide,PCN
【机 构】
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浙江大学生物技术研究所,杭州 310058
【出 处】
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第十届中国植物病害化学防治暨国际学术研讨会
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假单胞菌PC60是本实验室从小麦根围分离得到的对小麦赤霉病菌有显著抑制作用的生防细菌.基因组测序结果显示,该菌株基因组大小为6.82M,共编码6 162个蛋白,GC含量62.8％,系统进化树结果表明,PC60为绿针假单胞菌.研究通过次生代谢基因簇预测、突变体构建并结合活性物质分离、鉴定,明确了PC60抑制赤霉病菌的活性化合物为吩嗪-1-甲酰胺(phenazine-1-carboxamide,PCN).该菌株在金氏培养液中振荡培养72h后,菌液经乙酸乙酯萃取和纯化,PCN的产量能达到1g/L,是已报道PCN产量最高的微生物菌株.PCN对酵母、小麦赤霉病菌、稻瘟病菌、小麦纹枯病、灰霉病等植物病原真菌都具有显著的抑制活性；且与常用杀菌剂无交互抗性,不易产生抗药性,是有开发潜力的新型杀菌剂.为探索PCN的抑菌机制,研究采用HIP-HOP筛选酵母突变体库方法,获得对PCN敏感性有显著差异的酵母突变体共21株.对21个酵母突变体所对应基因的功能分析,推测PCN可通过干扰酵母的氧化胁迫调节、细胞周期、蛋白质合成等途径抑制酵母的生长.有趣的是,在赤霉病菌中利用同源重组法敲除了21个酵母突变体的同源基因,并测定所有赤霉突变体对PCN的EC50,结果发现：与野生型菌株PH-1相比,所有突变体对PCN的敏感性均无显著差异,表明PCN抑制丝状真菌和酵母的作用机制不同.研究将进一步以赤霉病菌为靶标生物,解析PCN抑制丝状真菌的作用机制,为后续创制以PCN为主效成分的微生物杀菌剂奠定基础.
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