【摘 要】
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为研究鲁豫冀地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)的遗传变异特征，对2006—2011年分离于山东、河南、河北发病猪场的15株PRRSV分离株，分别采用RT-PCR扩增其GP5基因序列并克隆测序，应用DNAStar等软件分析各分离株GP5序列的遗传变异情况。序列比较结果表明，15株分离株之间的氨基酸同源性为85.6—99.5％，有13株与已知变异株的亲缘关系较近，与JXAl株的氨基酸同源性为95.5
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院，吉林，长春，130062 山东省滨州畜牧兽医研究院兽医生物技术重点实验室，山
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为研究鲁豫冀地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)的遗传变异特征，对2006—2011年分离于山东、河南、河北发病猪场的15株PRRSV分离株，分别采用RT-PCR扩增其GP5基因序列并克隆测序，应用DNAStar等软件分析各分离株GP5序列的遗传变异情况。序列比较结果表明，15株分离株之间的氨基酸同源性为85.6—99.5％，有13株与已知变异株的亲缘关系较近，与JXAl株的氨基酸同源性为95.5—97.5％，2株与经典美洲株VR一2332株亲缘关系相近，氨基酸同源性分别为97.5和98.5％。系统进化树显示，以上1 3株分离株与JXAl株等其他2006年以后分离的变异株处于同一个亚群；鲁豫冀地区的PRRSVGP5蛋白的遗传进化无明显地域分布特征，但与三省区其他PRRSV毒株相比，实验室分离株之间的亲缘关系更为相近；2009年度病毒株在进化树中的分布相对集中。对蛋白氨基酸基序的分析表明，变异株在蛋白跨膜区、中和表位、N糖基化位点、毒力位点等的多个相关位点发生了变异。
其他文献
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以纯化的重组犬瘟热病毒(CDV)P1蛋白免疫BALB／c小鼠，应用常规杂交瘤技术获得两株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系，分别命名为E9E4C10和E9F8D9。间接ELISA检测腹水效价分别为1：106、1：106；亚类鉴定结果分别为IgG2b；Westcrn blot和ELIsA分析结果显示2株单克隆抗体均能与重组P1蛋白和CDV发生反应；ELISA叠加试验的增值结果表明两株单克隆抗体
为了能快速分析掌握流行性感冒病毒的型别及其流行情况，分别选取甲型流感病毒M基因128bp和乙型流感病毒NP基因107bp作为检测的目标基因，设计PCR特异性引物和不同发光基团标记的TaqMan探针，研发一种快速、准确、有效的鉴别甲型、乙型流感病毒的双重实时荧光定量RT—PCR方法，并评价其重复性、特异性和灵敏度。结果显示质粒标准曲线的方差系数为0.998，双重荧光定量RT—PcR方法灵敏度达到每个
水貂细小病毒(MEV)VP2蛋白是该病毒的主要结构蛋白，是病毒免疫保护性抗原。为研发水貂细小病毒基因工程疫苗，对该病毒的主要结构蛋白VP2编码基因的序列进行密码子优化并人工合成。利用大肠杆菌表达系统表达纯化了VP2重组蛋白，并免疫新西兰大白兔制备了多效价高且特异性好的克隆抗体。利用家蚕杆状病毒表达系统成功表达了VP2蛋白，经检测，VP2蛋白在家蚕体内具有较高的表达量并且可以形成病毒样颗粒。动物实验
衣壳蛋白VP60是兔出血症病毒粒子的主要结构蛋白，是病毒免疫保护性抗原。为研发兔出血症疫苗，对兔出血症病毒主要结构蛋白VP60的编码基因的序列进行密码子优化并。利用大肠杆菌表达系统获得重组蛋白并制备了效价高且特异性好的兔源多克隆。利用家蚕杆状病毒表达系统成功表达了VP60蛋白，经检测，VP60蛋白在家蚕中含量高并可形成病毒样空衣壳粒子。动物免疫实验显示，该空衣壳疫苗可有效刺激机体产生特异性抗体，攻
目的：为了建立可特异性地检测血清中抗小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体。方法：对具有PPRV特异性的N蛋白第1V区域进行扩增，并克隆至原核表达载体pET-32a(+)载体中，用于PPRV N亚单位重组蛋白的表达。用纯化的重组蛋白作为检测抗原，建立了检测血清中存在的抗PPRV抗体的间接ELISA方法，并对间接ELISA抗原包被量、血清稀释倍数、血清孵育时间等反应条件进行了优化。结果：western bl
为了解析基因型相同但宿主来源不同的新城疫病毒的全基因组差异。本文采用RT—PcR方法分别获得4株(JS／3／09／Ch，ZJ／3／10／Ch，AH／2／10／Du，JS／9／08／Go)Class I基因3型病毒的全基因组核苷酸序列，并与GenBank中已公布的Class I基因3型病毒全基因组序列进行比对分析。本实验4株病毒的基因组长度均为1 5198bp，在基因组1607—1608位有6碱基的
结构化教学能从多方面促进学生"学会学习",从而深度学习。在教学中,教师可以联系旧知,寻求起点对比分析,加强沟通;逆向思维,探索异同;总结经验,概括拓展;综合实践,创新应用等策略引导并帮助学生构建理性的思维体系,使学生能够以结构化的眼光去看待知识的学习过程,进而能够系统化的掌握学习技巧。
自2010年冬天华南地区部分鸭场爆发了一种以产蛋严重下降为主要特征的传染病，通过PcR检测和序列测定，该病原被确定为鸭坦布苏病毒。对广东地区鸭场分离鉴定的2株病毒Fs株和JM株进行基因组序列测定和分析，结果Fs株和JM株与国内最先报道的BYD一1株的序列相似性高达99％以上，与鹅黄病毒Js804序列相似性也高达99％以上。序列分析结果显示，鸭坦布苏病毒序列保守性高，鸭坦布苏病毒可能从我国华东地区迅
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