【摘 要】
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<正>目的:探讨在体外培养舌背粘膜上皮方法;并将神经元细胞与舌背粘膜上皮细胞共培养,探讨两者是否能共存,观察在各种生长因子及神经元细胞作用下,舌背粘膜细胞是否转分化形
【机 构】
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中山大学光华口腔医学院.附属口腔医院口腔颌面外科;
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<正>目的:探讨在体外培养舌背粘膜上皮方法;并将神经元细胞与舌背粘膜上皮细胞共培养,探讨两者是否能共存,观察在各种生长因子及神经元细胞作用下,舌背粘膜细胞是否转分化形成味蕾细胞.,材料与方法:(1)舌背上皮细胞的培养及鉴定:断颈处死出生后1天的SD大鼠,70%乙醇浸泡3-5min,切取舌体及下颌。D-Hank,s冲洗血迹,2.5g/L洗必泰浸泡5-8分钟,双倍浓度的双抗及两性霉素冲洗3-4次。置入盛有平衡液的三角烧杯内,于粘膜下注射胶原酶(1mg/ml),直至舌体发生肿胀,粘膜变白。370C恒温水浴箱内,胶原酶(0.2mg/ml)消化1h。剥离舌背粘膜,刮除粘膜下层残留的上皮细胞并收集。制备细胞悬液并以浓度为2×105/ml接种于培养瓶,移入370C、含5%CO2培养箱中培养,每隔2天换液1次。倒置显微镜下观察各代细胞形态、生长和增殖情况。当细胞铺满整个培养瓶底70%时,进行细胞传代。采
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