兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用

来源 :第六届全国组织工程与再生医学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuzhenguo_09
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目的:模拟体内微环境,探讨兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用. 方法:用钳夹法建立兔坐骨神经损伤模型,并采用组织匀浆器制作神经匀浆,高速离心取其上清液.从兔颈背部脂肪中分离培养脂肪干细胞并传至P3代,诱导前24h加10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)入培养液中以促分裂,再以正常坐骨神经、损伤3d、损伤7天及损伤14d坐骨神经匀浆上清液作为诱导剂进行诱导.诱导后观察细胞的形态变化;MTT法测定不同诱导剂诱导后细胞活性;免疫细胞化学染色检测细胞中S-100、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;RT-PCR检测诱导前后细胞的GFAP及S-100的变化. 结果:加入神经匀浆诱导后24h,部分细胞的形态已发生改变,4d后大部分细胞不仅在形态上表现为许旺样特征,而且5-100及GFAP等特异性抗体呈阳性表达,RT PCR结果也显示诱导组GFAP, S-100的表达增高,且损伤7d组阳性率最高。 结论:损伤坐骨神经匀浆上清液能够将脂肪干细胞诱导为类许旺细胞。
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