不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株转移相关基因的筛选和鉴定

来源 :中国抗癌学会肺癌专业委员会第十二届全国肺癌学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangchenglin427
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背景与目的:肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,肺癌的总治愈率仅有13%~15%,肺癌的远处转移是病人治疗失败的最主要原因.肿瘤的转移是一个多步骤、多阶段发生、多因素参与调控的极其复杂的过程.细胞株中nm23-Hl基因结构和转录表达均正常。本研究旨在比较人大细胞肺癌细胞株NL9980中nm23-Hl基因沉默前后表达谱的变化与具有不同转移潜能的人大细胞肺癌NL9980和L9981细胞株基因表达谱变化,并进行验证,筛选出与肺癌转移相关的基因,为肺癌侵袭转移的早期诊断、预后提供分子生物学指标。 方法:(1)阳离子脂质体瞬时转染nm23-Hl-siRNA短双链片段,Western Blot及实时定量PCR进行验证nm23-Hl蛋白水平及mRNA水平干扰效率;(2)应用人大细胞肺癌细胞株NL9980和L9981基因表达谱差异与沉默基因前后NL9980基因表达谱差异,筛选高转移潜能细胞与低转移潜能细胞的差异表达基因。 结果:(1)siRNA成功干扰人大细胞肺癌细胞株NL9980中nm23-Hl基因及蛋白表达;(2)计算机软件对比分析,得到64个表达趋势一致的基因,其中56个表达共同上调的基因,8个表达共同下调的基因。上调的基因包括uPA,SERPINE2,DKK1,LGALS3,JUN. SPRY家族等,下调的基因包括PLA2G4A,BCAP29等;时定量PCR结果相符。 结论:(1)本研究筛选出42个与肺癌转移相关的基因,包括38个在高转移潜能细胞株中表达上调的基因,和4个表达下调的基因。主要涉及细胞增殖,细胞迁移,细胞粘附,细胞凋亡,器官发育,癌基因等;(2)本研究发现尿激酶型纤溶酶激活因子(uPA)和丝氨酸蛋白酶抑制因子(SERPINE2)均参与肺癌的转移过程,SERPINE2可能参与uPA介导的侵袭转移。
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