【摘 要】
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血凝素是副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基
【机 构】
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北京市农林科学院畜牧兽医研究所; 首都师范大学生命科学院;
【基金项目】
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863项目(2005AA246051);北京市科技新星项目(2005B35)资助
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血凝素是副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基因序列(AF491827),设计合成了1对特异扩增Apg血凝素基因的引物。以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增出了1026bp的血凝素基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建了pET-HA原核表达质粒并在BL21大肠杆菌中过量表达。通过Western-blotting及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示成功地构建了Modesto株Apg血凝素基因的原核表达载体,表达并纯化了Apg重组血凝素蛋白,该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞。为进一步研究副鸡禽杆菌血凝素的免疫功能奠定基础。
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