【摘 要】
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为研究参与毛白杨开花发育过程中的一系列重要基因，获得全长基因序列，以成年毛白杨雄株和雌株(从花芽分化到开花)的16个时期的花芽为材料，分别提取各个时期雌、雄花芽的总RNA，等量混合，分离mRNA用SMART[TM]cDNA文库构建试剂盒所示方法，以λTrip1Ex2为载体分别构建了毛白杨雌，雄花芽的cDNA文库。经测定，雌、雄毛白杨花芽文库的初始滴度分别为8.0×105和7.2×105pfn/ml
【机 构】
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林木花卉遗传育种教育部重点实验室，北京林业大学毛白杨研究所 100083
【出 处】
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2006年全国博士生学术论坛——林业及生态建设领域相关学科
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为研究参与毛白杨开花发育过程中的一系列重要基因，获得全长基因序列，以成年毛白杨雄株和雌株(从花芽分化到开花)的16个时期的花芽为材料，分别提取各个时期雌、雄花芽的总RNA，等量混合，分离mRNA用SMART[TM]cDNA文库构建试剂盒所示方法，以λTrip1Ex2为载体分别构建了毛白杨雌，雄花芽的cDNA文库。经测定，雌、雄毛白杨花芽文库的初始滴度分别为8.0×105和7.2×105pfn/ml，扩增后滴度分别为2.60×108pfn/ml、2.56×108pfn/ml，重组率为90％，插入片段长度为0.4-2.5kb，这些数据表明文库质量达到质控要求。进一步利用毛白杨开花关键基因PtAP3的cDNA片段(725bp)为探针，采用DIG-DNA labelled and detection starter KitⅡ，通过斑点原位杂交技术快速筛选雄毛白杨cDNA文库。此方法对于筛选其他类型文库同样有借鉴意义，并为进一步从文库中筛选与毛白杨开花相关的全长基因及基因家族提供了有效的工具。
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