【摘 要】
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针对PRRSV ORF5基因组设计了1对特异性引物，利用RT-PCR的方法，对在广东省部分地区分离的4株PRRSV ORF5基因进行了基因扩增，克隆到pMD18-T载体后进行测序，获得了4株PRRSV ORF5基因全长603bp的核苷酸序列。利用生物信息学软件对4株PRRSVORF5基因序列进行了遗传进化分析，结果显示GD1、GD2、GD3、GD4株与美洲型参考株(VR-2332)的核苷酸序列同源
【机 构】
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华南农业大学 兽医学院，广东 广州 510642 江门市新会区畜牧局，广东 江门 524700
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
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针对PRRSV ORF5基因组设计了1对特异性引物，利用RT-PCR的方法，对在广东省部分地区分离的4株PRRSV ORF5基因进行了基因扩增，克隆到pMD18-T载体后进行测序，获得了4株PRRSV ORF5基因全长603bp的核苷酸序列。利用生物信息学软件对4株PRRSVORF5基因序列进行了遗传进化分析，结果显示GD1、GD2、GD3、GD4株与美洲型参考株(VR-2332)的核苷酸序列同源性分别为87.1％、87.2％、87.1％和86.9％。利用系统进化树分析表明GD1、GD2、GD3、GD4株均属于美洲型。进一步采用序列分析软件对病毒结构蛋白推导糖基化位点比较，结果表明不同毒株gp5糖基化位点在基序和位置上均有所不同，这可能与毒株的毒力、免疫原性的差异相关，这些为更好地了解广东省PRRSV的分子流行病学特征和抗原变异规律提供依据，同时为研制基因工程疫苗奠定了基础。
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利用反向遗传学操作技术，以A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)毒株为亲本株，采用RT-PCR技术对该病毒的8个基因片段分11段进行扩增，通过与双向转录载体pHW2000连接，转染293T和MDCK共培养细胞，成功拯救出全部基因均来自于A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)的猪流感病毒，生物学实验结果表明该拯救毒株在鸡胚半数感染量，组织培养半数感染量，稳定性试验等方面都与亲
蓝舌病(Bluetongue，BT)是一种经吸血昆虫传播，引起反刍动物疫病的急性病毒性传染病，是世界动物卫生组织(OIE)规定的上报疾病(以前为A类传染病)，我国将其列为一类动物疫病。蓝舌病对动物和动物制品国际间贸易具有非常重要的影响，国际组织和各国政府均将其列为动物疫病监测和防控的重点。其病原还是人用动物源生物制品(如人用牛源凝血酶、凝血因子Ⅷ、聚合牛血红蛋白、胸腺肽、羊胎盘素)和生物制品敷料(
小反刍兽疫病毒(PPRV)对绵羊和山羊的发病率和死亡率分别可高达100％和90％，在发展中国家引起严重的社会经济问题，被OIE列为A类疾病。该病首次报道于西非的科特迪瓦，其后流行于撒哈拉以南和赤道以北的多数非洲国家，中东到土耳其的几乎全部国家，在南亚、西亚、印度和它的领国都广泛传播。中国的周边国家老挝、孟加拉国、印度、尼泊尔、俄罗斯、巴基斯坦和缅甸等国都曾于2003年暴发过大规模的小反刍兽疫疫情。
根据GenBank发表的N1和N2亚型猪流感NA基因序列设计引物，扩增出NA基因片段，将其克隆到pFastBacGP67A和pFastBacGP67C杆状病毒载体上，筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67A-N1和pFastBacGP67C-N2，转化含有杆状病毒穿梭载体(Bacmid)的DH10Bac感受态细胞，构建杆状病毒表达载体获得重组转座子rBacmid-N1和rBacmid-N2，
本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)用于猪圆环病毒1型(PCV1)血清抗体的检测。对IPMA抗原反应板的制备、被检血清稀释倍数、酶标抗体及底物显色液等进行了系统试验。用IPMA法对已知PCV1和PCV2参考阳性血清进行试验表明，血清稀释倍数≥1:100可消除两种病毒间存在的低水平交叉反应。该方法与用昆虫杆状病毒表达的PCV1-Cap重组蛋白抗原建立的间接ELISA检测符合率为88
小反刍兽疫自2007年开始传入我国西藏地区，给我国养羊业安全带来极大威胁。但目前有关小反刍兽疫侵染方式、致病机理以及流行病学方面的研究相对较少。本文通过考察麻疹病毒这些方面的情况讨论了小反刍兽疫病毒特别的侵染方式、系统感染现象、免疫逃避机制、群体流行以及将来应该关注的研究重点。
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是以母猪生殖障碍和仔猪严重呼吸困难导致的高死亡率为特征的一种高度接触性传染病。本病于1987年首次在美国发现,又称“蓝耳病”，已流行于世界许多国家和地区，在我国也呈地方流行，对养猪业构成巨大威胁。PRRSV基因组为单股，正链RNA，大小为15kb左右。含8个开放阅读框架(ORF)，其中ORF1位于病毒基因组5端非编码前导序列之后，占基因组的80％，编码病毒RNA复制酶
以临床“高热综合征”病例中分离的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)-HBR变异株接种试验猪制备抗血清，采用硫酸铵盐析法提取血清中免疫球蛋白(IgG)，异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG，建立了一种直接免疫荧光诊断方法(DIFA)，用于病毒感染单层细胞及动物脏器组织切片中抗原检测。本试验对PRRSV感染MARC-145细胞增殖动力学检测结果表明，接种后16h检测到抗原阳性细胞，于60h～
采用RT-PCR技术对2001～2007年分离自山东地区10株(ShanDong-3、SD-JN、SD-ZQ、SD1、SD2、SD3、SD4、SD5、SD6和SD7)猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)进行ORF5、ORF6和ORF7基因的扩增、克隆和测序，与已知序列的毒株的相应片段进行同源性分析比较，并对其遗传演化关系进行分析。结果表明：该10株病毒仍属北美洲型，其中2001～2002年分离的S
从华南地区PRRSV(NSP2 1594-1680缺失)阳性的23个规模场、42个个体养殖场和15个散养户，随机采集发病、同群猪血清197份、组织样品115份，调查猪群个体感染PRRSV情况，并对核酸阳性样品进行CSFV、PRV、PCV2、SIV检测，调查PRRSV与这些病毒混合感染情况。结果表明：312份样品中224份PRRSV(NSP2 1594-1680缺失)核酸阳性，阳性率71.79％；P