粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分子改造及其催化氨苄西林半合成的研究

来源 :第十一届中国酶工程学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenghao131
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β-内酰胺类抗生素是目前世界市场上最重要的抗细菌感染药物,年生产量约为3×107kg,年销售额为150亿美元,市场份额为65%.半合成β-内酰胺类抗生素是其中最重要的一类.半合成抗生素一般由两步来合成:通过天然发酵产物的水解,得到了各种β-内酰胺母核;然后,母核与不同的侧链缩合合成了品种繁多的半合成抗生素.
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目的:探讨白介素18(IL-18)及IL-18受体(IL-18R)在免疫性血小板减少症(Idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者Th1类细胞因子优势应答中的价值.方法:应用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测15例急性期ITP患者和18例缓解期患者外周血单个
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目的:探讨IL-27在重型再生障碍性贫血(SAA)、中型再生障碍性贫血(MAA)中的表达及其与Th1、Th17亚群的关系.方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆IL-27、IFN-γ、IL-17水平;流式细胞仪测定外周血单个核细胞(PBMCs) Th1、Th17亚群比例;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测IL-27、IFN-γ、T-bet、IL-17、RORγ
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采用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)和厚涂片抗酸染色法分别检测216例结核患者的痰结核分枝杆菌((Mycobacterium Tuberculosis,MTB) DNA含量和厚涂片抗酸染色,并对结果进行对比分析.216例按厚涂片抗酸染色镜检视野分成6组,分别统计MTB-DNA监测结果,阳性率和测定值均以>10 1copy/ml.认为检测厚涂片抗酸染色和MTB-DNA,对临床结核分枝杆菌感染患
会议
目的:表达并纯化羊布鲁菌OMP22蛋白,制备其单克隆抗体(mAb).方法:采用GST亲和层析纯化的方法纯化OMP22蛋白.用灭活的羊布鲁菌M5株免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,用纯化的OMP22蛋白ELISA间接法筛选阳性克隆,3次克隆化后建立杂交瘤细胞系.采用小鼠腹腔接种杂交瘤细胞制备腹水,正辛酸-硫酸铵法纯化mAb.采用Western-blot、ELISA以及表位相加试验等方
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葡萄糖醛酸是由葡萄糖的伯醇羟基被氧化成羧基所形成的化合物,广泛存在于动植物中,具有重要的生物功能.葡萄糖醛酸中存在高反应活性的醛基和羧基,能结合含有羟基、巯基、羧基、氨基的有毒物质,增强有毒物质的水溶性,使之快速排出肾脏,达到排毒作用.
酶分子稳定性是长久以来人们关注的问题,相比引入二硫键、端部游离氨基酸去除、定点突变、端端序列替换,结合融合简单得多.碳水化合物结合结构域(CBM)是一种无催化活性结构域,源于海栖热袍菌TherrYiotogarYiaritirYia GHlO木聚糖酶的CBM9融合于黑曲霉A.niger GHl1木聚糖酶没有提高稳定性,拆分为较小的结构域Cl/C2融合于C-端,只有C2提高Xyn稳定性,而CI只提高
论文采用不能转运纤维二糖的酿酒酵母YP-βG(表达有粗糙脉孢菌β-葡萄糖苷酶GH1-1)作为出发菌株,将候选的黑曲霉纤维二糖转运蛋白基因在菌株YP-βG中表达,通过检测重组酵母能否在纤维二糖为唯一碳源培养基上正常生长,来判断候选蛋白是否具有转运纤维二糖的能力。
蛋白酶作为一种生物催化剂,在生物体内几乎参与催化所有的物质转化过程,与生命活动密切相关.蛋白酶因其独特的催化能力也被广泛应用于工业生物催化和医疗应用等方面.然而天然存在的蛋白酶的活性,特异性以及稳定性并没有达到工业和医疗应用上的要求,使得蛋白酶的应用受到了极大的限制.
漆酶(EC1.10.3.2)是一类含铜离子的氧化酶,从底物吸收电子并传递给氧气,将氧气还原成水,属于多铜氧化酶家族,在高等植物、真菌、细菌和昆虫中都有发现.漆酶可以催化多种底物,包括邻(对)苯二酚、氮羟基化合物、苯胺和呈现还原性的有(无)机化合物等.
D-氨基酸是合成许多药物、农药及食品添加剂的重要中间体,其中D-缬氨酸广泛存在于杀虫剂、兽药抗生素及药物中,如氟胺氰菊酯、沃尼妙林、青霉胺、放线菌素D、真菌孢肽、缬氨霉素等.此外,在细胞培养基中添加D-缬氨酸,可选择性抑制纤维细胞的增殖.