【摘 要】
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本研究利用RACE技术成功扩增了广西巴马小型猪近交系连续4代次及封闭群的猪内源性反转录病毒(PERV)3UTR,共获得了8条序列(GenBank登录号分别为:GQ475493、GQ475494、GQ475495、GQ475496、GQ475497、GQ475498、GQ475499、GQ475500),分为638 bp和749 bp两种不同的类型,都属于PERV-A亚型。以PERV-3UTR构建遗
【机 构】
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广西大学 动物科学技术学院,广西南宁 530005;广西壮族自治区兽医研究所 广西南宁 530001
【出 处】
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2010广州-东莞首届国际小型猪学术论坛
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本研究利用RACE技术成功扩增了广西巴马小型猪近交系连续4代次及封闭群的猪内源性反转录病毒(PERV)3UTR,共获得了8条序列(GenBank登录号分别为:GQ475493、GQ475494、GQ475495、GQ475496、GQ475497、GQ475498、GQ475499、GQ475500),分为638 bp和749 bp两种不同的类型,都属于PERV-A亚型。以PERV-3UTR构建遗传进化树,PERV-A,B,C分群清晰,3UTR可作为PERV亚型区分的另一基田序列。对调控元件定位分析,推测具有749bp类型3UTR的PERV病毒转录水平更高。在所获得序列的209~227 bp位置,发现了"CTTGAAACTT"10个碱基的1.9个重复。模拟RNA二级结构,广西巴马小型猪PERV-3UTR两种类型无论从空间构型、自由能,还是茎环数量都存在明显的不同。这些结果为全面评价广西巴马小型猪来源的PERV病原安全性提供了参考。
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为研究封闭群五指山猪生长规律,运用logistic、Gompertz、vonBertalanffy四种非线性模型拟合其生长曲线。结果表明:各模型的拟合效果均较好,拟合度(R2)都在0.99以上。Gompertz综合拟合效果优于其他模型,比较适宜拟合封闭群五指山猪的体重生长模式。Gompertz拟合封闭群五指山猪体重生长曲线的最大体重、拐点日龄、拐点体重和最大日增重分别为45.82kg、230.11
目的:分析直接法和间接法所选变量的特异性,初步对两种方法进行评价。方法:通过直接法和间接法对25例6-12月龄封闭群五指山猪(♂17,♀8)的下颌骨变量进行测定,并进行统计学分析。直接法系采用万能角度尺,游标卡尺、卷尺等仪器直接对23个主要变量进行测量;间接法通过数码相机拍照,采用PHOTOSHOP标尺进行11个变量的测定。结果:直接法所测下颌骨的23项变量中有6项性别间差异显著;间接法测定的11
自1998年,王希龙等课题组开始开展五指山猪的的保种选育与开发利用及相关研究,并取得实效。力促进五指山猪实验动物化,培育符合生物医学需要、标准化程度高的实验用猪,广东省实验动物所与广东大华农动物保健品股份有限公司合作建立了实验用五指山猪繁育基地,利用我国特有的五指山猪及其已有的保种选育成果,在保持其体小特性的前提下,在封闭群引种群遗传多样性丰富,近交群引种群基因纯合度高的基础上,继续闭锁,通过不同
目的:探讨自然分娩人工饲养能否获得SPF猪。方法:母猪自然分娩后2小时内,将仔猪处理后转到隔离器,用奶粉、米粉、饲料分别过渡人工饲养。其间分别接种7次益生菌,补充铁硒制剂两次。饲养至42天,测定其携带病原抗体。结果:仔猪成活率为75%,原猪场所具有的病原均被隔离,达到净化试验目的。结论:自然分娩人工饲养能获得无多种人畜共患疾病的净化五指山小型猪。
用全自动生化分析仪检测了五指山小型猪近交系、贵州小型猪和广西巴马小型猪封闭群25个血液生化指标。统计分析显示,三个品种间无差异的指标有3项,差异极显著(P<0.01)的指标有7项;三个品种中所有指标的变异系数平均值依次为:0.21,0.18和0.17。通过三个小型猪品种间同一指标的比较,以及与人类参考值、国外著名的哥廷根小型猪、地方猪品种和引进大型猪品种比较,为小型猪用于人类医学研究应用提供参考。
目的:建立实验用猪伪狂犬病病毒(PrV)的PCR检测方法。方法:根据PrV gB基因序列,应用primer5.0软件自行设计、合成一对引物进行PCR反应,优化反应条件,建立检测PrV的PCR方法,并应用于临床样品的检测。结果:以PrV上海株细胞培养物DNA为模板,扩增出263bp的特异性条带,对扩增产物进行克隆测序和BLAST在线比对,与GenBank中Prv的gB序列一致。对临床样品进行PCR检
目的:以DNA指纹法研究西双版纳小耳猪、广西巴马小型猪和贵州小型猪的遗传背景。方法:采用ECL核酸直接标记和检测试剂盒,以HRP(Horseradishperoxidase)标记JL-02多位点探针,对三种小型猪的HinfⅠ酶切图谱进行Southern杂交,以化学发光法进行检测,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图。结果:JL-02探针杂交西双版纳小耳猪所获得的大于2kb的谱带数在13~
目的:克隆五指山小型猪生长激素释放激素(GHRH)受体基因的cDNA,并对其进行序列分析。方法:以五指山小型猪耳组织提取的基因组RNA为模板,根据已报道的猪GHRHR cDNA序列设计3对引物,用RT-PCR方法进行cDNA扩增。PCR产物经回收纯化后,与pMD18-T连接并转化大肠杆菌DH5α,转化产物经PCR和双酶切鉴定后筛选出阳性克隆,阳性克隆经LB液体培养基培养鉴定后测序。结果:成功获得了
目的:分析我国特有三个品系小型猪-巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪糖尿病相关基因(IRS-1、Adiporl、PGC-1、LAPP、GLUT-4、PPAR-α,PPAR-γ)的单核秆酸多态性(SNP)分布情况,为我国小型猪在糖尿病和代谢性疾病的研究中提供基础资料。方法:以三个品系小型猪基因组DNA为模板,应用特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化测序,进行BLAST比对分析。结果:在小型猪
目的:利用维甲酸(RA)和二甲基亚砜(DMSO)诱导猪胚胎生殖细胞(EG 细胞)分化,证明猪胚胎生殖细胞能够在体外分化为多种组织细胞。方法:利用悬浮培养和无饲养层培养,将猪胚胎生殖细胞分化为拟胚体,再将拟胚体分别培养于添加RA和DMSO诱导剂的培养基中培养,诱导胚胎干细胞分化。结果:当悬浮培养时猪EG细胞形成拟胚体,再经RA和DMSO诱导分化为类桑椹胚体、类ES样细胞集落、神经样细胞和滋养层样细胞