【摘 要】
：
目的：利用一步法RT-QPCR建立一种快速可靠的血浆和脑脊液中肠道病毒通用型(Universal Enteric Virus；EV-U)的检测方法,用于儿童肠道病毒感染或肠道病毒性脑炎的临床诊断.方法：通过在Genbank上获取肠道病毒的5端的C翻译区序列设计扩增引物及Taqman探针,同时以5端的保守区域设计2对引物用于巢式PCR扩增.收集复旦大学附属儿科医院2015 ～2016年收治的儿童病毒
【机 构】
：
复旦大学附属儿科医院检验中心病毒室
论文部分内容阅读
目的：利用一步法RT-QPCR建立一种快速可靠的血浆和脑脊液中肠道病毒通用型(Universal Enteric Virus；EV-U)的检测方法,用于儿童肠道病毒感染或肠道病毒性脑炎的临床诊断.方法：通过在Genbank上获取肠道病毒的5端的C翻译区序列设计扩增引物及Taqman探针,同时以5端的保守区域设计2对引物用于巢式PCR扩增.收集复旦大学附属儿科医院2015 ～2016年收治的儿童病毒性脑炎或疑似患儿样本94例(脑脊液样本34例、血浆样本60例),以巢式PCR+测序为参比方法,对RT-QPCR的研究数据进行Kappa一致性分析.结果：RT-QPCR检测肠道病毒通用型的灵敏度为10 copies/μL,94例临床样本,共检测出44例阳性,阳性率为46.81％；而巢式PCR检出41例阳性,阳性率为43.62％,44例经测序证实全部为阳性结果,5例Ct值在35～37循环的RT-QPCR最初判断为阴性,经巢式PCR+测序证实仍为阳性.SAT与巢式PCR+测序方法的Kappa值为0.640,其阳性符合率为82.93％,特异性为81.13％,准确度为64.15％.结论：本研究建立的RT-QPCR检测脑脊液和血浆中EV-U的方法具有敏感性高、特异性强、准确、快速可靠的优点,适用于临床对肠道病毒性脑炎感染早期的快速诊断.
其他文献
论文目的：探讨钙调神经磷酸酶信号抑制剂环孢菌素A(CSA)联合密度感应信号分子法尼醇(Famesol)通过调控丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPKs)信号转导途径对白色念珠菌早期生物膜形成抑制作用的机制研究。论文方法：外构建标准菌株ATCC SC5314生物膜状态的白色念珠菌；采用XTT法、qRT-PCR法、Western Blot法分别检测经CSA、Farnesol、Famesol联合CSA不同处理
目的：探讨上海地区外阴阴道假丝酵母菌病的菌种分布及其主要致病菌的分子流行特点，并进行菌株的遗传进化分析.方法：收集2015年8月至2016年2月复旦大学附属妇产科医院、上海市第一妇婴保健院及国际和平妇幼保健院3所医院外阴阴道假丝酵母菌病患者假丝酵母菌共2185株，并进行菌种鉴定及统计分析，采用ATB FUNGUS 3试剂盒检测抗真菌药物体外最低抑菌浓度，并对其主要致病菌运用多位点序列分型(MLST
论文目的：通过检测HBV感染者外周血中效应性T细胞：Th17细胞、CD8+CD28+细胞，以及免疫抑制性T细胞：Treg细胞、CD8+CD28-T细胞，研究其网络作用与乙型肝炎发生发展的关系。论文方法：采集不同阶段HBV感染者外周全血，采用流式细胞术检测HBV感染者外周血中Th17细胞、CD8+CD28+细胞、Treg细胞和CD8+CD28-T细胞。采用实时荧光定量PCR检测HBV的DNA载量。组
论文目的：人乳头瘤病毒16型在宿主基因组中的整合状态以及整合位点附件的甲基化与宫颈癌的发生发展存在密切关系。本研究通过应用DIPS-PCR方法 和H合检测不同宫颈瘤变患者中HPV16基因在人基因组中的整合状态以及整合位点附近HPV16基因甲基化情况，分析两者在宫颈癌发生发展过程中的作用，为进深一步研究宫颈癌的致病机制提供理论基础。
论文目的：Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) play an important role in tumor progression.The aim of the present study was to investigate the prognostic value of MDSCs for early recurrence of hepatoce
论文目的：To design a novel pyrosequencing assay for APOE genotyping and determine the associations between apolipoprotein E(APOE)genotypes and serum levels of glucose,total cholesterol(TC),low density lip
Objective: To provide theoretical basis for the drug treatment of RA by studying effect of triptolide on the gene of collagen-induced arthritis rats joint synovial cells.Methods: After CIA rats synovi
论文目的：In recent years, the incidence of prostate cancer is constantly increasing among Chinese males.Previous studies showed that Hypermethylated in cancer 1(HIC1) was silenced both in huma prostate ca
论文目的：Epigenetic alterations as gene or DNA methylation have been highlighted as promising biomarkers for early cervical cancer screening.Herein, we evaluated the diagnostic performance of PAX 1 (paire
论文目的：嘌呤在癌症的发展过程中扮演着重要的角色,该信号通路受到一系列核苷酸酶调控。这些酶中,CD73是关键酶之一,可以催化AMP水解为腺苷,从而介导腺苷的生物学作用。目前的研究已经发现CD73高表达于多种实体肿瘤。多个因子和机制都参与CD73表达的调控。越来越多的研究发现CD73是体外癌细胞的增殖、转移和侵袭,体内肿瘤血管生成和肿瘤免疫逃逸机制的关键调控分子。基于CD73在肿瘤演进过程中的重要作