恒河猴外周血SIV/SHIV病毒储存库快速检测方法的建立

来源 :第十一届全国病毒学学术研讨会暨第六届武汉现代病毒学国际研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:letaopangpang
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  目的:建立用实时荧光定量PCR(Realtime fluorescence quantitative PCR)技术快速定量检测恒河猴外周血单个核细胞中的猴免疫缺陷病毒(SIV)/猴和人嵌合免疫缺陷病毒(SHIV)病毒DNA拷贝数的方法。方法:将带有SIV239-gag区标准序列的质粒p239SpSp5用限制性内切酶EcoR Ⅰ和Spe Ⅰ酶切得到长度为2090bp的SIV-gag区保守片段,经过纯化后根据其分子量计算相应的拷贝数,并定量至2× 109 copies/μl且10倍倍比稀释作为SIV/SHIV病毒DNA荧光定量检测的系列标准品。
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