【摘 要】
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目的:培育表达抗流感Mx-RNAis基因转基因(TG)鸡,为转基因鸡技术平台、转基因鸡抗病育种奠定基础.方法:以鸡β-actin系统性表达启动子,应用慢病毒载体转移技术将Mx-RNAis基因
【出 处】
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2013‘第十一届中国北方实验动物科技年会
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目的:培育表达抗流感Mx-RNAis基因转基因(TG)鸡,为转基因鸡技术平台、转基因鸡抗病育种奠定基础.方法:以鸡β-actin系统性表达启动子,应用慢病毒载体转移技术将Mx-RNAis基因导入家禽,通过PCR、RT-PCR、Southern blot、Western blot、Tail-PCR法分析外源基因的整合位点等方法筛选、鉴定TG鸡;用禽流感病毒(H5N1)感染4周龄TG鸡与野生型(WT)鸡,观察感染后鸡的死亡情况,感染后3、6天咽拭子、肺组织病毒滴度的检测,q-PCR方法检测细胞因子相对表达.结果:分子生物学方法鉴定,获得5只FO代表达Mx-RNAis的TG鸡,繁育至F2代,在血液与组织中能够检测到外源基因的整合,确定外源基因整合到鸡基因组2号染色体;禽流感病毒感染实验表明,TG鸡在一定程度上能提高抗禽流感病毒能力.结论:成功获得表达抗流感Mx-RNAis基因的转基因鸡,转基因鸡能高效表达目的基因,外源基因可以稳定遗传,转基因鸡有一定抗流感病毒的作用.
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