【摘 要】
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目的 通过建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导P-选择素基因敲除鼠(P-selectin-/-)心肌纤维化模型,探讨P-选择素对AngⅡ诱导心肌纤维化的影响及其与自噬的关系.方法 分别选取40
【机 构】
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山西医科大学第一医院,陕西省太原市030001
【出 处】
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第十二次全国动脉硬化性疾病学术会议
论文部分内容阅读
目的 通过建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导P-选择素基因敲除鼠(P-selectin-/-)心肌纤维化模型,探讨P-选择素对AngⅡ诱导心肌纤维化的影响及其与自噬的关系.方法 分别选取40只体重匹配的18 ～20 g野生C57BL/6小鼠(wild type)和C57 BL/6同遗传背景的P-选择素因敲除鼠(P-selectin-/-),随机分为4组,每组10只,野生C57BL/6小鼠+血管紧张素Ⅱ[1000 ng/(min·kg),连用7天](阳性对照),P-选择素-/-+血管紧张素Ⅱ[1000 ng/(min·kg),连用7天](实验组),野生C57BL/6小鼠+PBS(阴性对照),P-选择素-/-+PBS(阴性对照).采用血管紧张素Ⅱ微量泵灌注(7天)构建心脏纤维化模型,术前3天及术后第4-7天测血压,以确定血管紧张素Ⅱ灌注成功.术后第7天,用肝素盐水灌注动物,取心脏组织.Masson'染色观察各组小鼠心脏纤维化程度,NIS-ELEMENT软件计算切片中纤维化区域在心脏整体面积中所占比例,定量分析各组间差别.通过Western blot检测各组自噬相关蛋白LC3、Beclin1的表达情况.结果 心肌组织Masson'染色结果：与阴性对照组相比,阳性对照组与实验组心肌纤维化显著增加(P＜0.05).与阳性对照组相比,实验组心肌纤维化显著下降,差异显著(P＜0.05).Western blot检测线粒体自噬相关蛋白LC3、Beclinl的表达情况：与阴性对照组相比,阳性对照组与实验组Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值明显增加(P＜0.05).与阳性对照组相比,实验组Beclin1的表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值下降,有显著性差异(P＜0 05).结论 血管紧张素Ⅱ可以诱导心肌纤维化；P-选择素的基因敲除,可抑制血管紧张素Ⅱ灌流引起的心脏纤维化；P-选择素通过增强自噬作用加重心肌纤维化程度.
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